配合飼料、鮮魚對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長和相關(guān)基因表達(dá)影響;中華絨螯蟹長江口奇、偶年群體的遺傳變異分析.pdf

1、中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)是中國特有的一種重要水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)生物,在水產(chǎn)業(yè)中具有獨(dú)特的地位。本文采用養(yǎng)殖生物學(xué)、水生動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)等研究手段,通過野外采樣、室外養(yǎng)殖、實(shí)驗(yàn)室分析等方法研究了配合飼料和新鮮羅非魚對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、脂肪酸組成和相關(guān)基因表達(dá)的影響,并分析了長江口奇、偶年群體的遺傳差異與關(guān)系,為中華絨螯蟹的養(yǎng)殖利用和種質(zhì)保護(hù)提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支撐。
　　試驗(yàn)一:配合飼料和鮮魚對(duì)

2、中華絨螯蟹幼蟹生長和肝胰腺脂肪酸組成的影響
　　配合飼料和野雜魚是當(dāng)前中華絨螯蟹養(yǎng)殖中的最主要餌料。本章以幼蟹為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,采用網(wǎng)箱同池飼養(yǎng)法,研究了配合飼料和鮮魚(羅非魚)對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長和肝胰腺脂肪酸組成的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)過130天的飼養(yǎng)后,配合飼料與鮮魚對(duì)中華絨螯蟹幼蟹的體重、殼長、特定生長率、肝胰腺指數(shù)等指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05),雌雄蟹成活率均是羅非魚組顯著高于配合飼料組(P<0.05),而早熟率和增重率則是羅

3、非魚組顯著低于配合飼料組(P<0.05)。在脂肪酸組成上,肝胰腺中主要脂肪酸為 C18:1n-9、C16:0、C18:2n-6、C16:1n-7,且 n-3 P UF A含量明顯少于n-6 P UF A。配合飼料組C16:1n-7、C14:1n-5、C17:1 n-7、C22:1n-9、C24:1n-9、C18:3n-3、C20:5n-3、C22:6n-3等脂肪酸含量顯著高于羅非魚組(P<0.05),而C18:1n-7、C18:1n-9

4、、C20:1n-9、C18:2n-6卻顯著低于羅非魚組(P<0.05);無論配合飼料還是新鮮羅非魚,雄蟹脂肪酸中的C18:2n-6、C18:3 n-3、C20:5n-3、C22:6n-3含量均高于雌蟹,但差異不顯著(P>0.05)。
　　試驗(yàn)二:配合飼料和鮮魚對(duì)中華絨螯蟹幼蟹肝胰腺FAS、FABP、ALF基因表達(dá)的影響
　　為探討配合飼料和鮮魚對(duì)中華絨螯蟹幼蟹肝胰腺中脂肪酸合成、轉(zhuǎn)運(yùn)以及抗菌方面的影響,研究了配合飼料和羅非魚

5、投喂130天后,中華絨螯蟹幼蟹肝胰腺中脂肪酸合成酶(FAS)、脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)、抗脂多糖因子(ALF)基因的表達(dá)差異。結(jié)果顯示:①羅非魚組的FAS基因表達(dá)量顯著高于配合飼料組(P<0.05);②配合飼料組的FABP基因表達(dá)量顯著高于羅非魚組(P<0.05);③羅非魚組的ALF基因表達(dá)量略高于配合飼料組,但差異不顯著(P>0.05);④同種飼料雌雄間的基因表達(dá)量差異都不顯著(P>0.05)。研究結(jié)果綜合表明,配合飼料和鮮魚會(huì)對(duì)肝

6、胰腺中相關(guān)基因的表達(dá)產(chǎn)生顯著影響。
　　試驗(yàn)三:中華絨螯蟹奇、偶年天然群體的遺傳差異
　　為檢驗(yàn)長江野生中華絨螯蟹是否存在奇、偶年份系譜群體,采用18對(duì)微衛(wèi)星引物,對(duì)2004、2006～2011共7年采集的中華絨螯蟹長江天然群體進(jìn)行了遺傳分析。結(jié)果表明:①偶年群體(2004、2006、2008、2010)的觀測(cè)雜合度和期望雜合度顯著高于奇年群體(2007、2009、2010)(P<0.05);②奇、偶年群體間的遺傳分化系數(shù)(

7、FST)差異顯著(P=0.024);③基于遺傳距離的NJ聚類關(guān)系樹表明:偶年群體和奇年群體形成較為明顯的兩個(gè)遺傳聚類;④主成分分析(PCA)和STRUCTURE遺傳聚類分析均表明:奇、偶年兩類群的分化明顯,但兩群體間存在一定程度的遺傳漸滲與基因交流;⑤兩個(gè)偶年(2004、2006)和兩個(gè)奇年(2007、2011)群體檢測(cè)到顯著的遺傳瓶頸效應(yīng)。研究結(jié)果綜合表明:長江天然中華絨螯蟹群體存在較明顯的奇年與偶年系譜,但兩系譜間也存在一定程度的基