梨黑斑病菌拮抗細(xì)菌的篩選鑒定及其拮抗活性的初步研究.pdf

1、梨是我國(guó)三大水果之一。梨黑斑病是由鏈格孢屬（Alternariasp.）真菌引起的一種病害，是梨三大重要病害之一。目前控制梨黑斑病的主要方法仍然以化學(xué)殺菌劑為主。但化學(xué)殺菌劑存在著抗藥性和農(nóng)藥殘留等問(wèn)題，對(duì)人體和環(huán)境構(gòu)成威脅。因此，篩選抗菌譜廣、生防活性高以及對(duì)環(huán)境安全的新型細(xì)菌，從而制備高效的生防菌劑，可作為化學(xué)防治梨黑斑病的有效補(bǔ)充，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，降低對(duì)環(huán)境的污染。
　　從全國(guó)13個(gè)省市自治區(qū)的100余份梨黑斑病樣品中分

2、離得到152株梨黑斑病菌。根據(jù)培養(yǎng)性狀的差異，可將這152株菌株分為8大類，并各選出代表性菌株進(jìn)行產(chǎn)孢培養(yǎng)。其中分離自江蘇豐縣的菌株FX02菌落顏色為墨綠色，產(chǎn)孢量較多，室內(nèi)接種離體葉片可引起黑斑病。因此將FX02作為供試菌株，開(kāi)展梨黑斑病菌拮抗細(xì)菌的篩選工作。采用稀釋平板法，從陜西乾縣、安徽碭山、江蘇句容等地的梨黑斑病病葉樣品中分離得到613株細(xì)菌菌株，通過(guò)室內(nèi)平板拮抗得到一株對(duì)梨黑斑病菌有顯著抑制作用的拮抗細(xì)菌。該菌株分離自江蘇句容

3、酥梨梨黑斑病樣品，命名為JR-C。通過(guò)培養(yǎng)性狀觀察、Biolog以及16SrDNA序列綜合分析，將JR-C鑒定為枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）。胞外酶活性檢測(cè)顯示:該菌產(chǎn)生蛋白酶和纖維素酶，不產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶和β-1，3-葡聚糖酶。此外，該菌的上清液可以抑制梨黑斑病菌菌絲的正常生長(zhǎng)以及孢子的萌發(fā)，當(dāng)上清液濃度達(dá)到20％時(shí)，可明顯觀察到梨黑斑病菌菌落與對(duì)照菌落相比減小92.19％;當(dāng)JR-C上清液濃度為50％時(shí)對(duì)梨黑斑病原菌