黃瓜菌核病拮抗細(xì)菌的分離、鑒定及抑菌活性初步研究.pdf

1、本文旨在從日光溫室蔬菜根際土壤中分離篩選對(duì)黃瓜菌核病等植物土傳病害致病菌具有良好拮抗活性的生防細(xì)菌，考察其用于植物病害防治的潛力，并對(duì)其抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行初步探討。 利用平板稀釋法和點(diǎn)接法相結(jié)合，對(duì)采自山東泰安、日照、淄博、濟(jì)南、德州、聊城、壽光、濰坊、諸城等9個(gè)地市黃瓜日光溫室的土壤樣品進(jìn)行拮抗細(xì)菌的分離和篩選，共獲得21株對(duì)黃瓜菌核病菌具有拮抗活性的細(xì)菌，其分布率與田間發(fā)病率呈正相關(guān)。平板對(duì)峙法復(fù)篩發(fā)現(xiàn)，其中有4株細(xì)菌對(duì)黃瓜菌

2、核病菌具有強(qiáng)拮抗作用，以．BSH-4抑制率最高為91.1％，抑菌帶寬為18.5mm，繼代培養(yǎng)10代的培養(yǎng)物抑菌率達(dá)到88.5％。各菌株在抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)時(shí)，均與病原菌之間形成明顯的抑菌寬帶，說(shuō)明該拮抗菌對(duì)黃瓜菌核病菌的抑制機(jī)理主要為抗生物質(zhì)的產(chǎn)生。 顯微觀察結(jié)果表明，4株生防細(xì)菌對(duì)黃瓜菌核病菌菌絲微觀結(jié)構(gòu)影響各不相同。其中，BMP-11處理使黃瓜菌核病菌菌絲變得粗大、彎曲，形成分隔，菌絲體內(nèi)原生質(zhì)聚集成塊；BL02處理則使菌絲

3、體變粗，體壁溶解，壁內(nèi)原生質(zhì)聚集、外溢，菌絲體逐漸變得稀薄透明；BSH-4處理病原菌菌絲扭曲變粗，菌絲體內(nèi)原生質(zhì)褐化、聚集，但無(wú)外溢現(xiàn)象；ZB13處理對(duì)菌核病菌菌絲的微觀影響相對(duì)較弱，除菌絲變細(xì)、分枝增多外，無(wú)其他明顯變化。 抑菌譜測(cè)定結(jié)果表明，4株拮抗細(xì)菌均具有廣譜抑菌活性，其中BMP-11抑菌活性最高，對(duì)黃瓜猝倒病菌、蔓枯病菌、枯萎病菌、立枯病菌、番茄早疫病菌、辣椒疫病病菌、茄子綿疫病菌等7種病菌均具有強(qiáng)烈抑制作用，對(duì)除黃瓜

4、猝倒病菌和辣椒疫病病菌以外的其他5種病菌的抑菌帶寬度均在15mm以上，其次是BL02和BSH-4，對(duì)番茄早疫病菌的抑菌帶寬度也在15mm以上，ZB13對(duì)7種病原菌也均有不同程度的抑制作用，但活性相對(duì)較弱。 采用生理生化特性分析和16SrDNA序列分析兩種方法對(duì)4株生防菌進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明：BMP-11菌屬于多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxa)、BL02菌屬于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis

5、)、BSH-4和ZB13菌等同屬于短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)。 通過(guò)種子處理、離體葉片接種、溫室盆栽試驗(yàn)和田間防效試驗(yàn)，以及常用殺菌劑對(duì)生防菌的抑制試驗(yàn)，初步研究了各生防菌的最佳應(yīng)用途徑及使用方法。結(jié)果表明上述拮抗菌株兼具防治植物病害和促進(jìn)植物生長(zhǎng)的潛能。利用發(fā)酵液混以載體涂抹在植物病部防治菌核病效果較佳。由于一般常用殺菌劑在田間用量下對(duì)各生防菌基本無(wú)影響，可以將生物菌劑與化學(xué)藥劑同時(shí)使用，以取得更好的防治