棉花輪紋斑病及其拮抗細(xì)菌的篩選和鑒定.pdf

1、棉花輪紋斑病是棉花葉部病害中分布最廣、危害最大、流行頻率很高的一種毀滅性病害。近年來，輪紋斑病上升為一種重要病害，在我國主要棉區(qū)都有發(fā)生，早發(fā)、重發(fā)田塊減產(chǎn)30％～50％，造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究對(duì)棉花輪紋斑病田間發(fā)病規(guī)律、病原菌鑒定、生物學(xué)特性及其拮抗細(xì)菌的篩選與鑒定進(jìn)行了系統(tǒng)研究，為病害診斷和預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)提供理論依據(jù)，為輪紋斑病的生物防治奠定基礎(chǔ)，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
　　 通過2010年在廊坊實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行的不同品種棉花輪紋斑

2、病田間發(fā)病調(diào)查，結(jié)果表明，不同品種棉花輪紋斑病的發(fā)病嚴(yán)重程度存在一定差異，棉花品種對(duì)輪紋斑病的抗性存在差異。田間消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)表現(xiàn)為：子葉期即開始出現(xiàn)，進(jìn)入8月份后，病害發(fā)生加快，8月6日至9月6日病害迅速發(fā)展，9月26日病情指數(shù)達(dá)到最高峰，病害的發(fā)生具有普發(fā)性、爆發(fā)性的特點(diǎn)。
　　 從我國4個(gè)省，2個(gè)直轄市和1個(gè)自治區(qū)采集的棉花病葉組織中共分離到鏈格孢(Alternariaspp.)17個(gè)菌株，通過用離體接種涂抹法進(jìn)行了病原菌致病性

3、測(cè)定，結(jié)果表明，17個(gè)菌株均為輪紋斑病的致病菌。通過形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)方法對(duì)分離的17株病原菌菌株進(jìn)行鑒定，結(jié)果表明，A1、A2、A4、A5、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A16、A15、A17、A21這16個(gè)菌株為鏈格孢菌(Alternaria alternata)，A3為大孢鏈格孢菌(Alternaria macrospore)。對(duì)棉花輪紋斑病菌菌株A1的生物學(xué)特性進(jìn)行研究，結(jié)果表明，營養(yǎng)條件、光照、

4、溫度、濕度、不同棉花品種葉片研磨液等環(huán)境條件對(duì)分生孢子萌發(fā)有顯著影響。
　　 采用平板對(duì)峙培養(yǎng)法，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室已初步篩選出的10株拮抗細(xì)菌進(jìn)行再次篩選，結(jié)果表明，10株拮抗細(xì)菌的抑菌率均在50％以上，其中jk5的抑菌率最高，達(dá)到了78.1％，抑菌半徑可達(dá)到15.8 mm，通過多次試驗(yàn)其抑菌效果穩(wěn)定并具有較廣的抗菌譜。在光鏡下觀察，拮抗細(xì)菌jk5對(duì)病原菌分生孢子、菌絲均有抑制和破壞作用，被抑制的病原菌分生孢子、菌絲生長(zhǎng)畸形。對(duì)拮抗細(xì)

5、菌jk5進(jìn)行室內(nèi)防效試驗(yàn)，結(jié)果表明，jk5對(duì)NJ0712、寧4-14和中植棉2號(hào)這三個(gè)品種的輪紋斑病均有較好的防效，防效分別為66.94％、77.12％、81.82％。田間防效試驗(yàn)結(jié)果顯示，噴施拮抗細(xì)菌jk5發(fā)酵液的病情指數(shù)要低于對(duì)照組，jk5對(duì)田間病害發(fā)生具有一定的防治作用。通過形態(tài)特征的觀察、生理生化指標(biāo)測(cè)定和16S rDNA分子生物學(xué)方法對(duì)jk5菌株進(jìn)行鑒定，確定拮抗細(xì)菌ik5為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。