煙草根圍土壤拮抗細菌的篩選及控病研究.pdf

1、煙草是葉用經(jīng)濟作物，對煙葉的品質(zhì)和安全性要求較高。根據(jù)煙草病害發(fā)生的普遍性及所造成的經(jīng)濟損失來衡量，煙草赤星病(Alternariaalternata)、煙草黑脛病(Phytophthoraparasitica)和煙草青枯病(Ralstoniasolanacearum)是煙草上除煙草病毒病以外發(fā)生最普遍、危害最嚴重的侵染性病害。在煙草病害的多種防治方法中，生物防治對煙葉生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展具有較好的應用前景。芽孢桿菌(Bacillusspp

2、.)具有顯著的生防潛力，是病害生防微生物的重要組成部分。熒光假單胞桿菌(Pseudomonasfluorescent)廣泛存在于土壤中，其多數(shù)株系具有防治植物病害和促進植物生長的雙重功效。本研究從重慶不同地縣煙區(qū)的煙草根圍土壤中分別篩選對上述三種病害有生防潛力的拮抗菌，并對其進行初步鑒定。 1、從重慶石柱、黔江、奉節(jié)等地縣煙區(qū)共采集到煙草根圍土樣85份。采用土壤懸浮液高溫處理分離法獲得了芽孢菌499株，采用在KMB培養(yǎng)基上土壤稀

3、釋分離法獲得了熒光菌253株，兩種分離方法共獲得細菌752株。 2、對煙草赤星病菌和煙草黑脛病菌采用對峙培養(yǎng)法、對煙草青枯病菌采用平板噴霧法初篩到有拮抗活性的菌株348個，占分離株總數(shù)的46.3％。復篩結果表明：對赤星菌抑菌帶寬在8.0～12.0mm的拮抗菌株有29株，其中芽孢菌12株，熒光菌17株；對黑脛菌抑菌帶寬在9.0～14.0mm的拮抗菌株有26株，其中芽孢菌2株，熒光菌24株；對青枯菌抑菌圈直徑在30.0～42.0mm

4、的拮抗菌株有31株，其中芽孢菌9株，熒光菌22株。 3、溫室控病結果表明：對煙草赤星病的防治效果為31.31％～87.51％，其中菌株P-72-10的防治效果最好，防效在80.00％以上的菌株有4個。對煙草黑脛病的防治效果為30.44％～73.91％，其中菌株P-71-2防治效果最好，防效在70.00％以上的菌株有2個；對煙草青枯病的防治效果為46.00％～86.00％，其中菌株P-76-2的防治效果最好，防效在80.00％以上

5、的菌株有5個。 4、在平板抑菌和溫室控病的基礎上，結合拮抗菌生長的情況及菌株間沒有拮抗性的要求，篩選出芽孢菌B-43-6和熒光菌P-72-10組合，二者的發(fā)酵菌懸液按不同比例混合抑制煙草赤星病(菌)，平板拮抗和溫室防效的最佳比例均是4∶1，平板抑菌帶寬為7.6mm，溫室防效為91.83％；芽孢菌B-57-4和熒光菌P-70-3組合，二者的發(fā)酵菌懸液按不同比例混合抑制煙草青枯病(菌)，平板拮抗和溫室防效的最佳比例均是3∶1，平板抑

6、菌帶寬為5.1mm，溫室防效為92.0％。 5、對平板抑菌和溫室控病篩選出的10株菌進行抗菌譜測定，結果表明：這10株菌具有較廣的抗菌譜，特別是對玉米小斑病菌、小麥赤霉病菌和煙草根黑腐病菌等具有較強的抑制作用。 6、對抗菌譜測定中的10株菌進行了分類地位的初步鑒定，通過形態(tài)觀察和生理生化測定，初步認為：5株熒光菌P-3-1、P-69-6、P-70-3、P-71-2、P-72-10均為熒光假單胞桿菌；5株芽孢菌B-16-4