煙草青枯病拮抗真菌的篩選、鑒定及活性產(chǎn)物研究.pdf

1、煙草青枯病是由茄青枯勞爾氏菌屬的假單胞桿菌(Ralstonia solanacearum)引起的細菌性病害，多發(fā)于熱帶、亞熱帶煙區(qū)，在我國主要是長江流域及其以南煙區(qū)，其中以四川、廣東、福建、湖南及貴州煙區(qū)最為嚴(yán)重，發(fā)病重的地塊產(chǎn)量損失可達80％以上。傳統(tǒng)的化學(xué)防治方法成本高、污染重，輪作和微生物防治成為解決此問題的重要方案。其中，微生物防治方法具有無污染、無公害、長效性等優(yōu)點，能從根本上解決了藥劑殘留、病原菌抗藥性等問題的影響，有利于環(huán)

2、境的凈化和生態(tài)資源的良性循環(huán)。
　　 本研究針對煙草青枯病菌，主要進行了拮抗真菌的篩選、鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化、發(fā)酵液育苗試驗及活性產(chǎn)物穩(wěn)定性的研究。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.采用稀釋法從重慶黔江煙區(qū)健康土壤中分離到59株真菌。采用濾紙片法進行篩選，獲得了對煙草青枯病菌具有較強拮抗活性的2個真菌菌株，編號為3F03和7F06，其抑菌圈直徑分別為：10.0mm和9.5mm。經(jīng)反復(fù)平板拮抗試驗，抑菌圈直徑無明顯差異。

3、　　 2.通過對菌株3F03和7F06的形態(tài)和培養(yǎng)特征觀察、全細胞脂肪酸分析和rDNA ITS序列分析，初步鑒定結(jié)果顯示：拮抗真菌3F03和7F06分別為煙曲霉(Aspergillus fumigatus)和淺黃新薩托菌(Neosartorya aureola)。
　　 3.以菌株3F03和7F06發(fā)酵液處理的煙苗生長狀況良好，與對照相比，在種子發(fā)芽率、苗高、苗重、根長及根重方面都沒有顯著的變化。其中，稀釋10倍的3F03發(fā)酵

4、液和稀釋100倍的7F06發(fā)酵液兩個處理有一定程度的促生作用。
　　 4.以代謝產(chǎn)物的抑菌活性及產(chǎn)量為指標(biāo)，初步確定了菌株3F03的最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度28℃、發(fā)酵時間96h、接種量5％、裝液量50mL/150mL；菌株7F06的最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度28℃、發(fā)酵時間120h、接種量3％、裝瓶量100mL/150mL。
　　 5.以不同處理下代謝產(chǎn)物的抑菌活性為指標(biāo)，測定了菌株3F03和7F06活性產(chǎn)物的穩(wěn)定性。發(fā)