煙草赤星病拮抗細(xì)菌Ata28菌株的誘變選育.pdf

1、煙草赤星病是煙草生產(chǎn)上重要的真菌性病害，其病原菌為鏈格孢屬真菌[Alternariaalternata(Fries)Keissler]，在煙草成熟后期危害十分嚴(yán)重，造成重大經(jīng)濟(jì)損失。對煙草赤星病的防治，目前主要采用化學(xué)防治為主的防治技術(shù)，由于煙草是葉用經(jīng)濟(jì)作物，對煙葉的外觀和內(nèi)在質(zhì)量有特殊的要求，農(nóng)藥殘留、病原菌抗藥性以及對卷煙衛(wèi)生的影響，限制了農(nóng)藥的大規(guī)模利用，因此有必要尋找新的防治途徑以克服農(nóng)藥殘留和病原菌抗藥性等問題；生物防治安全

2、、無污染、無公害，可以克服農(nóng)藥殘留和病原菌抗藥性等問題，是煙草上有害生物進(jìn)行綜合治理的發(fā)展方向。Ata28菌株是從重慶煙區(qū)煙草健康植株上分離獲得的煙草赤星病拮抗細(xì)菌，在PDA平板上可明顯抑制煙草赤星病強(qiáng)致病力菌株Tbs3的生長，溫室控病效果較好；為了進(jìn)一步提高拮抗細(xì)菌Ata28菌株對煙草赤星病的防治效果，本研究采用紫外線、紫外線和氯化鋰、硫酸二已酯及微波對Ata28菌株進(jìn)行誘變選育，以期獲得拮抗性能更強(qiáng)，生物學(xué)性狀更好的優(yōu)良菌株，為大田

3、使用提供理論依據(jù)和實踐經(jīng)驗。 1采用紫外線誘變Ata28菌株時，通過預(yù)備實驗，計算Ata28菌株在不同誘變時間的致死率和正變率，選擇該菌株的最佳誘變時間10s，20s，30s誘變；通過平板對峙培養(yǎng)，篩選出15個突變菌株在PDA平板上可明顯抑制Tbs3的生長，抑菌帶高于出發(fā)菌株Ata28，抑菌帶最大值達(dá)9.4mm；在溫室控病中，獲得了對煙草赤星病有較好防效的突變菌株Uv-126，煙苗經(jīng)Uv-126菌液處理3d后接種Tbs3的防治效

4、果達(dá)52.2﹪，比出發(fā)菌株Ata28的防治效果好。 2.采用紫外線和氯化鋰復(fù)合誘變Ata28菌株，通過預(yù)備實驗，計算Ata28菌株在不同誘變時間的致死率和正變率，選擇該菌株的最佳誘變時間10s，15s誘變；通過平板對峙培養(yǎng)，篩選出8個突變菌株在PDA平板上可明顯抑制Tbs3的生長，抑菌帶高于出發(fā)菌株Ata28，抑菌帶最大值達(dá)9.7mm；經(jīng)溫室控病初篩和復(fù)篩試驗，獲得了對煙草赤星病有較好防效的突變菌株Uvl-190、Uvl-199

5、，煙苗經(jīng)Uvl-190、Uvl-199菌液處理3d后，接種Tbs3的防治效果達(dá)51.3﹪、54.9﹪，比出發(fā)菌株Ata28的防治效果好。 3.采用硫酸二已酯誘變Ata28菌株，通過預(yù)備實驗，計算Ata28菌株在不同誘變時間的致死率和正變率，選擇該菌株的最佳誘變時間20min，40min，60min誘變；通過平板對峙培養(yǎng)，篩選出17個突變菌株在PDA平板上可明顯抑制Tbs3的生長，抑菌帶高于出發(fā)菌株Ata28，抑菌帶最大值達(dá)10.

6、5mm；經(jīng)溫室控病初篩和復(fù)篩試驗，獲得了對煙草赤星病有較好防效的突變菌株Des-66、Des-50，煙苗經(jīng)Des-66、Des-50菌液處理3d后，接種Tbs3的防治效果達(dá)52.0﹪、56.6﹪，比出發(fā)菌株Ata28的防治效果好。 4.經(jīng)微波誘變煙草赤星病拮抗細(xì)菌Ata28菌株，通過預(yù)備實驗，計算Ata28菌株在不同誘變時間的致死率和正變率，選擇該菌株的最佳誘變時間60s，120s，180s誘變；通過平板對峙培養(yǎng)，篩選出17個突

7、變菌株在PDA平板上可明顯抑制Tbs3的生長，抑菌帶高于出發(fā)菌株Ata28，抑菌帶最大值達(dá)10.9mm；經(jīng)溫室控病初篩和復(fù)篩試驗，獲得了對煙草赤星病有較好防效的突變菌株Mw-110，煙苗經(jīng)Mw-110菌液處理3d后，接種Tbs3的防治效果達(dá)58.0﹪，比出發(fā)菌株Ata28的防治效果好。 5.將各種誘變方法誘變獲得的對煙草赤星病菌Tbs3具有一定的抑制作用，溫室控病效果最好的突變菌株Uv-126、Uvl-199、Des-66和Mw