煙草赤星病致病力分化及拮抗菌拮抗機(jī)制初步探究.pdf

1、煙草赤星病是煙葉成熟期的主要真菌病害，對(duì)煙草產(chǎn)量和品質(zhì)有嚴(yán)重影響。目前對(duì)赤星病致病力分化的報(bào)道很多，不同菌株之間毒性差異較大，但總體上看該菌致病力多數(shù)處于中等偏上水平，表現(xiàn)為毒力強(qiáng)，危害嚴(yán)重，而畢節(jié)作為貴州省第二大主產(chǎn)煙區(qū)，關(guān)于赤星病的研究還沒有相關(guān)報(bào)道，因此本研究采集畢節(jié)主要煙區(qū)病原菌對(duì)其進(jìn)行致病力分化測(cè)試分析，并在此基礎(chǔ)上對(duì)不同致病力菌株的生物學(xué)特性和四種胞外酶活性及與致病力的關(guān)系進(jìn)行了初步探索。同時(shí)，畢節(jié)煙區(qū)可利用的生防菌資源較少

2、，為合理開發(fā)適應(yīng)本地環(huán)境的生防菌種，我們對(duì)分離自畢節(jié)煙區(qū)的生防菌L2對(duì)赤星病菌的拮抗作用和機(jī)理進(jìn)行了初步探索，為開發(fā)防治煙草赤星病的生防菌劑提供了理論依據(jù)，主要研究結(jié)果如下：
　　1、采用組織塊培養(yǎng)法與單孢分離法進(jìn)行病原菌的分離，通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察初步獲得35株赤星病菌，之后挑選具有代表性的4個(gè)菌株進(jìn)行了種的鑒定，其中GzufA-10、GzufA-39鑒定為鏈格孢（Alternaria alternata），GzufA-26、Gzuf

3、A-40鑒定為細(xì)極鏈格孢（Alternaria tenuissima）。
　　2、采用離體葉片菌餅法對(duì)35株赤星病菌進(jìn)行了致病力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：不同菌株對(duì)感病煙草品種 K326的致病力存在差異，35株赤星病菌病情指數(shù)在0-92.7之間，其中非致病菌株5株，強(qiáng)致病力菌株4株，較強(qiáng)致病力菌株4株，中等致病力菌株14株，弱致病力菌株8株。同時(shí)，經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察顯示菌株的穿透生長(zhǎng)能力與致病力明顯呈正相關(guān)。
　　3、選取15株不同致病

4、力菌株，分別測(cè)定了菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量、產(chǎn)毒量等生物學(xué)特性與致病力的關(guān)系，結(jié)果表明，菌株的菌絲生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量隨著致病力的減弱逐漸增加；毒素產(chǎn)量則隨著致病力的減弱而逐漸降低。
　　4、選取不同致病力菌株：GzufA-26、GzufA-15、GzufA-28、GzufA-48、Gzuf A-47、GzufA-10分別測(cè)定了菌株在28℃下淀粉酶、纖維素酶、漆酶和愈創(chuàng)木酚酶4種胞外酶活性與致病力的關(guān)系。結(jié)果表明：強(qiáng)致病力菌株分泌的淀粉酶

5、、纖維素酶活性比中等致病力和弱致病力的菌株高；但漆酶和愈創(chuàng)木酚酶活性變化不明顯，沒有表現(xiàn)出規(guī)律性，這說(shuō)明畢節(jié)煙區(qū)赤星病病原菌分泌淀粉酶與纖維素酶活性的高低是造成致病力分化的重要原因之一。
　　5、以煙草鏈格孢菌（Alternaria alternata）為指示菌，通過(guò)初篩與復(fù)篩獲得1株高效拮抗生防菌株 L2，經(jīng)形態(tài)學(xué)、生理生化，分子等鑒定手段鑒定為巨大芽孢桿菌（Bacillus magaterium）。
　　6、對(duì)L2菌株的

6、穩(wěn)定性、L2菌株對(duì)赤星病菌的最佳作用方式及L2菌株對(duì)病原菌生長(zhǎng)發(fā)育的影響進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明： L2菌株的無(wú)菌濾液對(duì)熱穩(wěn)定，對(duì)紫外線穩(wěn)定，在4-11de pH范圍內(nèi)穩(wěn)定；在離體葉片上 L2菌株對(duì)赤星病的最佳防治方式為鈍化作用；L2菌株粗代謝物對(duì)菌株的菌絲生長(zhǎng)、孢子萌發(fā)和產(chǎn)孢量均表現(xiàn)為抑制作用。在誘導(dǎo)植物抗性方面，結(jié)果表明L2菌株接種能夠誘導(dǎo)煙草體內(nèi)苯丙氨酸解胺酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和過(guò)氧化物酶(POD)活性較未接種有不同程度