玉米ZMGrp3基因遺傳差異及啟動子分析.pdf

1、Glycine-richproteins(GRPs)在高等植物中普遍存在的,它是除伸展蛋白和脯氨酸富含蛋白以外的第三類組成細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)蛋白,其主要生物學(xué)性質(zhì)是加強(qiáng)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,有助于大量拉伸纖維的形成。ZmGrp3是從玉米CDNA庫中分離克隆出來的一種根特異性表達(dá)基因,根作為植物重要的營養(yǎng)器官,擔(dān)負(fù)著植物的吸收、合成、儲存和輸導(dǎo)。因此,對ZmGrp3基因及其啟動子的研究具有廣泛的應(yīng)用價值。
　　本研究主要涉及根部特異性表達(dá)Z

2、mGrp3基因啟動子表達(dá)載體的構(gòu)建和功能分析以及ZmGrp3基因的結(jié)構(gòu)特征和多態(tài)性分析,結(jié)果如下:
　　1、從21種玉米自交中分別克隆出ZmGrp3基因,運(yùn)用生物信息學(xué)對基因結(jié)構(gòu)與特征分析,我們發(fā)現(xiàn)ZmGrp3蛋白為疏水性蛋白,其蛋白主要由甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸以及蘇氨酸組成,其中甘氨酸占整個蛋白的40-50％,蛋白二級結(jié)構(gòu)主要是α-螺旋、β-折疊和無規(guī)則卷曲。
　　2、對21種自交系測序結(jié)果進(jìn)行分析可知,其基因間遺傳差異

3、并不大,大多由于純化選擇作用造成,少數(shù)存在正向選擇作用。
　　3、從玉米B73自交系克隆出ZmGrp3啟動子,長度為2241bp。對啟動子序列分析可知,其含有CAAT-BOX、GATA-BOX、TATA-BOX等順式作用元件以及AGCT核心序列。
　　4、將其與含有GUS報告基因的pCAMBIA1301雙元表達(dá)載體連接,構(gòu)建新型表達(dá)載體,然后通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化將新型載體轉(zhuǎn)化到水稻中花11中,經(jīng)過篩選和分子檢測獲得轉(zhuǎn)基因