冷應激對產蛋雞氧化損傷機制的研究.pdf

1、環(huán)境溫度是蛋雞生存重要環(huán)境因素之一，低溫環(huán)境對蛋雞生產造成了嚴重破壞。低溫環(huán)境刺激下產生冷應激，一方面造成了飼料利用效率降低，另一方面影響了蛋雞的生產狀態(tài)，但是冷應激對蛋雞的負面作用機制尚不清楚。本文主要從低溫環(huán)境對產蛋雞體溫，能量代謝指標，線粒體質子通道(avUCP、ANT) mRNA表達以及對抗氧化水平、應激指標等方面的影響來研究冷應激對于氧化損傷機制。
　　 1.本試驗選擇40周齡、健康、體重相近、個體差異較小的海蘭灰商品

2、蛋雞40只，平均體重為1.415Kg。隨機分成8組（即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ）每組5個重復，其中Ⅰ-Ⅶ為試驗組（選擇Ⅰ-Ⅴ為冷應激組，Ⅵ、Ⅶ為恢復組），Ⅷ為對照組。選擇試驗組Ⅶ和對照組Ⅷ進行體溫試驗，各組預先放入到密閉室內（溫度:21±2℃，相對濕度:75±4％，風速小于0.4m/s）預處理12 h。試驗開始時將試驗組雞只迅速轉入室外，對照組Ⅷ也同時開始試驗。冷應激組Ⅰ-Ⅴ按照順序依次在室外低溫刺激2h、4h、6h、8h、10h

3、，恢復組Ⅵ、Ⅶ在冷應激10h后迅速轉入到密閉室內分別恢復2h，4h。室外冷應激環(huán)境為河北省保定市，2012年1月19號河北農業(yè)大學標本園19:30到次日5:30室外環(huán)境（平均溫度:-8.68±2.12℃平均相對濕度:76.05±18.59％平均風速:0.42±0.01 m/s），體溫測定以30分鐘為周期進行翅下溫度測定和直腸溫度測定。測定顯示冷應激環(huán)境下試驗組Ⅶ較對照組Ⅷ體溫（直腸溫度、翅下溫度）降低，而在恢復過程中試驗組Ⅶ體溫升高并超

4、出對照組Ⅷ。
　　 2.試驗分組同試驗1，對血清樣品進行測定結果顯示:(1)能量代謝水平:應激組Ⅴ葡萄糖水平升高顯著(P＜0.05)，乳酸水平顯著降低(P＜0.01)，應激組Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ丙酮酸水平顯著升高(P＜0.05)，應激組乳酸丙酮酸比值Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ顯著下降(P＜0.01)，且恢復組Ⅵ相對于應激組Ⅴ顯著升高(P＜0.01)。應激組Ⅲ血清中甘油三酯水平相對于對照組Ⅷ和恢復組Ⅵ、Ⅶ顯著升高，差異極顯著(P＜0.01);恢復組Ⅵ與應激

5、組Ⅲ、Ⅳ相比顯著降低(P＜0.01)。應激組Ⅲ中游離脂肪酸水平相對于對照組以及恢復組Ⅵ、Ⅷ顯著增加(P＜0.05)。應激組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清尿酸水平相對于對照組升高，且差異極顯著(P＜0.01)。(2)激素水平:與對照組Ⅷ相比應激組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ以及恢復組Ⅵ組中血清中胰島素水平顯著升高(P＜0.05)，應激組Ⅰ、恢復組Ⅶ胰島素水平與對照組差異不顯著(P＞0.05)。應激組Ⅳ中血清中T3水平相對與對照組Ⅷ相比顯著升高(P＜0.05)，恢

6、復組Ⅵ相對于應激組Ⅳ、Ⅴ血清T3水平顯著下降(P＜0.05)。應激組Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組中血清T4水平相對于對照組Ⅷ與恢復組Ⅶ顯著升高(P＜0.05)。相對于對照組Ⅷ應激組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ，以及恢復組Ⅵ胰島素抵抗指標HOMA-IRI水平顯著升高(P＜0.05)。相對應的胰島素敏感指標ISI與對照組Ⅷ與恢復組Ⅶ相比應激組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ以及恢復組Ⅵ顯著降低(P＜0.05)。
　　 3.試驗步驟同試驗2，對胸肌和腿肌樣本進行測定結果顯示:在冷應

7、激環(huán)境下應激組Ⅴ，恢復組Ⅵ、Ⅶ相對于對照組Ⅷ胸肌組織中avUCP mRNA水平顯著升高(P＜0.05)，而其他應激組相對于對照組變化不顯著(P＞0.05)。腿肌組織中應激組Ⅳ、Ⅴ，恢復組Ⅵ、Ⅶ相對于對照組ⅧavUCP mRNA水平顯著升高(P＜0.05)。胸肌組織中ANT mRNA的表達水平在試驗各組間無顯著性差異(P＞0.05);應激組Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ及恢復組Ⅵ相對于對照組腿肌組織中ANT mRNA水平顯著升高(P＜0.05)。

8、　　 4.應激試驗步驟同試驗2，通過對血液和組織樣品進行分析結果顯示:與對照組Ⅷ相比應激組Ⅴ和恢復組Ⅵ、Ⅶ血清中膽堿酯酶的活性顯著下降(P＜0.05)。與對照組Ⅷ相比應激組中Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ肌酸激酶的活性顯著升高(P＜0.05)，恢復組Ⅶ中肌酸激酶活性相對于其他組升高顯著(P＜0.05)。冷應激過程和恢復過程對乳酸脫氫酶和γ-谷氨酸轉肽酶活性影響不明顯(P＞0.05)。
　　 低溫環(huán)境下，相對于對照組Ⅷ和恢復組Ⅶ應激組Ⅱ肝臟GSH-

9、PX水平顯著升高(P＜0.05)。應激組Ⅴ、Ⅵ組肝臟中T-SOD酶活性相對于對照組Ⅷ和應激組Ⅰ組顯著升高(P＜0.05)。應激過程和恢復過程肝臟組織中T-AOC、MDA水平變化不顯著(P＞0.05)。
　　 與對照組Ⅷ相比，恢復組Ⅵ腎臟中T-AOC顯著升高(P＜0.05)，而應激組間T-AOC變化不明顯(P＞0.05)。與對照組相Ⅷ應激組Ⅰ恢復組Ⅶ相比，恢復組ⅥT-SOD活性升高顯著升高(P＜0.05)。樣品中GSH-PX活性以

10、及MDA含量變化不顯著(P＞0.05)。
　　 應激組Ⅳ胰腺T-AOC水平相對于應激組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ以及恢復組Ⅵ、Ⅶ顯著升高(P＜0.05)，恢復組Ⅵ相對于應激組Ⅳ、Ⅴ顯著降低(P＜0.05)。應激組Ⅱ、Ⅲ以及恢復組胰臟中GSH-PX相對于應激組Ⅰ顯著下降(P＜0.05)。相對于對照組Ⅷ以及應激組Ⅲ應激組Ⅰ MDA含量較高，且差異顯著(P＜0.05)。在試驗過程中胰臟中T-SOD活性變化不顯著(P＞0.05)。
　　 相對于

11、對照組Ⅷ，骨骼肌中應激組Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ中T-AOC顯著升高(P＜0.05)。應激組Ⅳ、Ⅴ以及恢復組Ⅵ、Ⅶ中GSH-PX含量相對于應激組Ⅱ降低，且差異顯著(P＜0.05)。應激組ⅡGSH-PX活性相對于對照組Ⅷ升高(P＜0.05)。應激組Ⅳ相對于應激組Ⅰ肌肉組織中T-SOD活性顯著升高(P＜0.05);與應激組Ⅳ相比，應激組Ⅴ以及恢復組Ⅵ、Ⅶ總T-SOD活性顯著降低(P＜0.05);與對照組Ⅷ相比恢復組ⅦT-SOD活性顯著降低。相對于對照組Ⅷ