圍產(chǎn)期山羊子宮頸糖皮質(zhì)激素受體、合成酶定位及脂肪細(xì)胞定位研究.pdf

1、糖皮質(zhì)激素是哺乳動(dòng)物分娩啟動(dòng)的重要激素，不僅可以引起子宮收縮力的改變，通過多種途徑參與分娩，而且在分娩啟動(dòng)時(shí)各種激素間相互協(xié)調(diào)中發(fā)揮著樞紐作用。它主要由腎上腺皮質(zhì)分泌，現(xiàn)已證明其他部位如胎盤、卵巢、子宮等組織器官也可分泌，包括皮質(zhì)醇和皮質(zhì)酮，牛、羊等所分泌的90％以上是皮質(zhì)醇。糖皮質(zhì)激素必須與其受體相結(jié)合才能發(fā)揮作用。糖皮質(zhì)激素受體分為GRα和GRβ，主要以GRα形式存在。參與糖皮質(zhì)激素活性轉(zhuǎn)化的酶類主要是11β-羥基類固醇脫氫酶(11

2、β-HSD)。11β-HSD分為11β-HSD1、11β-HSD2兩種。11β-HSD1是氧化還原酶，以還原作用為主，可使無活性的可的松還原為有活性的皮質(zhì)醇。11β-HSD2是專一性氧化酶，使有生物活性的皮質(zhì)醇轉(zhuǎn)變?yōu)闊o活性的可的松。
　　目前國內(nèi)外就糖皮質(zhì)激素受體、合成酶在圍產(chǎn)期山羊子宮頸中的定位以及mRNA表達(dá)與分娩前后子宮頸收縮和舒張的關(guān)系是否一致的研究較少，資料仍然缺乏。為了闡述上述問題，本試驗(yàn)分別采集健康山羊產(chǎn)前兩天、產(chǎn)前

3、一天、分娩期、產(chǎn)后一天以及產(chǎn)后兩天的子宮頸，用Western Blot法檢測兔抗人糖皮質(zhì)激素受體蛋白(NR3C1)多克隆抗體，兔抗人11β-HSD1多克隆抗體及兔抗人11β-HSD2多克隆抗體在圍產(chǎn)期山羊子宮頸組織中的特異性;用免疫組織化學(xué)法分別對(duì)NR3C1、11β-HSD1和11β-HSD2進(jìn)行定位;用RT-PCR法檢測NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平;用油紅O染色法來檢測各時(shí)期子宮頸中脂肪細(xì)胞的

4、分布。結(jié)果顯示:NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2在圍產(chǎn)期山羊子宮頸中除黏膜上皮和漿膜層外均有分布，以子宮頸平滑肌和血管平滑肌中分布最多。通過檢測其陽性率可發(fā)現(xiàn)NR3C1、11β-HSD1在分娩期最多，而11β-HSD2在產(chǎn)后一天最多。NR3C1、11β-HSD1 mRNA在分娩期表達(dá)水平最高，而11β-HSD2 mRNA表達(dá)水平在產(chǎn)后一天最高。脂肪細(xì)胞在整個(gè)圍產(chǎn)期均有分布，主要存在于山羊子宮頸的肌間、血管、腺管基底層以及黏

5、膜上皮下。在分娩期為大脂滴，其他四期為小脂滴。結(jié)果表明，脂肪細(xì)胞中的脂滴由小變大為分娩時(shí)子宮頸擴(kuò)張?zhí)峁┠芰浚瑫r(shí)脂肪細(xì)胞中含有甘油和膽固醇酯，而膽固醇是合成類固醇激素的原料，而且試驗(yàn)證明了子宮頸本身含有糖皮質(zhì)激素的合成酶與受體，并且陽性率與mRNA表達(dá)水平相一致，這就證明子宮頸是一個(gè)獨(dú)立的內(nèi)分泌組織，能合成與分泌糖皮質(zhì)激素。血管和子宮頸平滑肌中的糖皮質(zhì)激素受體與合成酶的含量在分娩期時(shí)最多，意味著合成的糖皮質(zhì)激素多，然后作用于本身，從而使