龍膽水提物通過FXR及其靶基因?qū)δ懼俜e大鼠保護(hù)作用的機(jī)制研究.pdf

1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是個人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名篁立壟蝥日期：矽1 夠年6 月6 日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位

2、論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。( 保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名三未芝丕生論文導(dǎo)師簽名j 弛日期：加f 眵年多月6 日‘摘 要目的：從膽汁酸自身反饋調(diào)節(jié)角度探討龍膽水提物( T h ea q u e o u se x t r a c t

3、o fG e n t i a n as c a b r aB g e ．a(chǎn)s c a b r a B g e ．a(chǎn)s c a b r aB g e ．，G A ) 通過F X R 及其靶基因( S H P 、N T C P 、M R P 2 、B S E P 和C Y P 7 a 1 ) 對Q 一萘異硫氰酸酯( Ⅱ一n a p h t h y l i s o t h i o c y a n a t e ，A N I T ) 誘導(dǎo)的急性肝

4、內(nèi)膽汁淤積模型大鼠護(hù)肝利膽的作用及機(jī)制。方法：1 ．G A 的急性毒性考察將4 0 只l ( M 小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為4 組，即空白對照組、( 4 8g ／k g ) G A 高劑量組、( 2 4g ／k g ) G A 中劑量組、( 1 2g ／k g ) G A 低劑量組，每組l O 只，雌雄各半。按4 0m L ／k g灌胃給藥，給藥4h 后正常飼養(yǎng)，觀察7 d 。2 ．G A 對正常大鼠的利膽作用研究將4 0 只S D 大鼠按體

5、質(zhì)量隨機(jī)分為4 組，即：空白對照組、G A 高劑量組、G A 中劑量組、G A 低劑量組，每組1 0 只?？瞻讓φ战M和G A 高、中、低劑量組每日一次同一時間段內(nèi)分別給予生理鹽水和1 ．2g ／k g 、0 ．6g ／k g 和0 ．3 g ／k gG A 灌服，連續(xù)給藥7 天。末次給藥2h 后，使用烏拉坦麻醉大鼠后行膽管插管手術(shù)，術(shù)后收集大鼠的膽汁和血液樣品。通過對膽汁流速；膽汁內(nèi)T B A 、T B I L 、G S H 和D B

6、I L 的含量；血清內(nèi)T B A 、T B I L 和D B I L 的含量以及A S T 、和A L P 的活性來評價G A 對正常大鼠的影響3 ．G A 對A N I T 誘導(dǎo)的急性肝內(nèi)膽汁淤積鼠的保肝利膽作用及機(jī)制研究將6 0 只S D 大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為6 組，即：模型對照組、模型組、模型+ 陽性藥物熊去氧膽酸組( U r s o d e o x y c h 0 1 i ca c i d ，U D C A ) 和模型+ G A

7、 高、中、低劑量組，每組1 0 只，連續(xù)給藥7 天。模型對照組和模型組的大鼠每日一次給予生理鹽水灌服。在實(shí)驗(yàn)的第5 天，模型組給予A N I T ( 1 0 0m g ／k g ) 僅一次灌服誘導(dǎo)急性肝內(nèi)膽汁淤積的模型，而模型對照組給予植物油一次對照處理，誘導(dǎo)處理2h 后均按原劑量繼續(xù)給藥。陽性藥物對照組每天給予灌服U D C A ( 6 0m g ／k g ) ，模型+ G A 高、中、低劑量組每天分別給予G A l ．2g ／k g

8、 、0 ．6g ／k g 和0 ．3g ／k g 灌服，在實(shí)驗(yàn)的第5 天，模型+ U D C A組和模型+ G A 低、中、高劑量組分別給予A N I T ( 1 0 0m g ／k g ) 僅一次灌服誘導(dǎo)急性肝內(nèi)膽汁淤積的模型，誘導(dǎo)處理2 h 后均按原劑量繼續(xù)給藥。在實(shí)驗(yàn)的第7 天( A N I T誘導(dǎo)造模4 8h 后) ，使用烏拉坦麻醉大鼠后行膽管插管手術(shù)，術(shù)后收集大鼠的膽汁，血液和肝組織樣品。通過對膽汁流速；膽汁內(nèi)T B A 、T

9、 B I L 、G S H 和D B I L 的含量；血清內(nèi)T B A 、T B I L 和D B I L 的含量以及A S T 、A L T 和A L P 的活性；肝組織形態(tài)學(xué)；肝組織中法尼醇受體( F a r n e s o i dXr e c e p t o r ，F(xiàn) X R ) 、小異源二聚體伴侶( S m a l lh e t e r o d i m e rp a r t n e r ，S H P ) 、膽固醇7 a 羥化酶(