大黃素對大鼠肝內膽汁淤積相關轉運體基因表達的研究.pdf

1、目的:探討大黃素對a-萘異硫氰酸酯(ANIT)致急性肝內膽汁淤積的保護作用。
　　 背景:膽汁淤積是正常的膽汁流被損害或阻斷,膽汁酸和其他有害物質在肝臟中過度蓄積而引發(fā)的肝損傷。它是多種疾病的組成部分,如:膽石癥、妊娠肝內膽汁淤積癥、原發(fā)性膽汁性肝硬變和原發(fā)性硬化性膽管炎等。近年來研究發(fā)現定位于肝細胞膜竇面和微膽管面上的轉運體對維持正常的膽汁流和肝臟功能起著重要作用。
　　 大黃素即1,3,8-羥基-6-甲基葸醌,是從已

2、廣泛用于臨床治療淤膽型肝炎的傳統(tǒng)中藥大黃根莖提純的一種葸醌類衍生物,具有廣泛的藥理學作用,如:抗炎、抗病毒、抑菌、免疫調節(jié)和肝保護等。推測大黃素能緩解膽汁淤積可能與調節(jié)肝細胞膜上轉運體基因的表達有關。
　　 方法:采用ANIT灌胃制備大鼠急性肝內膽汁淤積病理模型。將32只大鼠隨機平均分為正常組、正常+大黃素組、模型組和模型+大黃素組。造模前,模型+大黃素和正常+大黃素組給予大黃素40mg/kg/d灌胃,正常組及模型組給予羧甲基纖

3、維素鈉處理,均持續(xù)到處死動物之前,于實驗第5天給藥后4小時,模型組和模型+大黃素組100mg/kg ANIT灌胃1次建立模型,其余兩組予以橄欖油對照處理,建模后48小時處死動物,收集標本。觀察各組實驗動物肝功能各項生化指標TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA的變化和肝臟組織病理學改變。
　　 結果:(1)模型組與正常組比較,TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA濃度明顯增高(P＜0.01)；光鏡下可見肝

4、細胞變性和壞死、中性粒細胞浸潤。(2)模型+大黃素組與模型組比較,TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA均降低(P＜0.01或P＜0.05)；組織病理學改變輕微。(3)正常+大黃素組與正常組比較上述各指標均無顯著變化(P＞0.05)。
　　 結論:大黃素能明顯降低膽汁淤積大鼠血清中TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP和TBA濃度,顯著降低膽汁酸的毒性作用,抑制肝損傷。
　　 目的:探討大黃素治療大鼠急性

5、肝內膽汁淤積的作用機制。
　　 方法:采用ANIT灌胃制備大鼠急性肝內膽汁淤積病理模型,將32只大鼠隨機分為正常組、正常+大黃素組、模型組和模型+大黃素組,采用實時熒光定量RT-PCR檢測肝細胞膜轉運蛋白基因膽鹽輸出泵(BSEP)、多藥耐藥相關蛋白2(MRP2)、鈉-?；悄懰峁厕D運蛋白(NTCP)、多藥耐藥蛋白2(MDR2)、多藥耐藥蛋白la(Mdrla)、多藥耐藥蛋白lb(Mdlrb)、多藥耐藥相關蛋白3(MRP3)和核受體法

6、尼酯衍生物X受體(FXR)mRNA水平的表達,Western blot方法檢測肝臟P-糖蛋白(P-gp)的變化。
　　 結果:(1)模型組與正常組比較,在mRNA水平NTCP和FXR表達降低(P＜0.01),MDR2,Mdrlb和MRP3表達增高(P＜0.01或P＜0.05),BSEP,Mdrla和MRP2表達無顯著差異(P＞0.05);在蛋白水平P-gp表達增高(P＜0.05)。(2)模型+大黃素組與模型組比較,NTCP,MD

7、R2,Mdrla,Mdrlb和MRP3 mRNA水平表達高于模型組(P＜0.01或P＜0.05),但BSEP,MRP2和FXR的表達無顯著差異(P＞0.05)；P-gP表達同時也高于模型組(P＜0.05)。(3)正常+大黃素組與正常組比較上述各指標均無顯著變化(P＞0.05)。
　　 結論:大黃素通過上調肝臟中與膽汁酸代謝相關的轉運蛋白MRP3和P-gp的表達以減少膽汁酸及其他有毒化合物在肝臟中的蓄積可能為其退黃、恢復肝臟功能的