異煙肼、利福平對小鼠膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體Ntcp、Bsep的表達(dá)影響研究.pdf

1、目的:研究異煙肼(INH)與利福平(RFP)單用及合用致小鼠肝損傷模型中對肝細(xì)胞上膽汁酸有關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)體Ntcp、Bsep表達(dá)的影響。探討利福平與異煙肼合用引起肝損傷加重是否與這些轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)變化有關(guān)。
　　方法:選用SPF級56只成年雌性ICR小鼠(ICR mouse)(29.8±1.4g)，按照完全隨機(jī)分組原則分為7組，實驗組分別給與50mg/kg INH，100mg/kgRFP,50mg/kg+100mg/kg INH+RFP,1

2、00mg/kg INH,200mg/kg RFP,100mg/kg+200mg/kg INH+RFP，對照組給予空白溶劑，連續(xù)給藥2周，第15天將小鼠以水合氯醛麻醉，摘除眼球取血，離心取上清，用于肝功能生化指標(biāo)測定，每組每只留取肝臟組織分別于10％福爾馬林固定用于病理切片、HE染色;4％多聚甲醛固定用于目標(biāo)蛋白免疫組化測定;Western blot測定目標(biāo)蛋白Ntcp及Bsep的表達(dá)。
　　結(jié)果:高劑量INH+RFP能夠引起生化指

3、標(biāo)ALT、AST、TBil、DBil、ALP、TBA、MDA顯著變化，肝臟形態(tài)及病理結(jié)果顯示有肝損傷，低劑量INH、RFP、INH+RFP則變化較小。免疫組化及Western blot結(jié)果示對照組和各實驗組Ntcp及Bsep均有表達(dá)，單用組及合用組較正常對照組相比，Ntcp蛋白表達(dá)均下調(diào)(P＜0.01)，H-INH+RFP較L-INH+RFP組Bsep表達(dá)明顯下調(diào)(P＜0.01)。Ntcp、 Bsep蛋白的表達(dá)與血清中膽汁酸的分泌量呈負(fù)

4、相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.320，-0.391，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:高劑量INH、RFP單用及合用均造成小鼠肝損傷，INH單用及與RFP合用均能有下調(diào)膽汁酸有關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)體Ntcp及Bsep蛋白的表達(dá)，高劑量時對轉(zhuǎn)運(yùn)體Bsep的表達(dá)影響更為明顯，INH單用及與RFP合用誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型的血清生化指標(biāo)與組織病理學(xué)的變化明顯滯后于轉(zhuǎn)運(yùn)體的顯著變化，INH、RFP引起肝損傷病理狀態(tài)可能是轉(zhuǎn)運(yùn)體與內(nèi)源性物質(zhì)（膽紅素、