板藍(lán)根群藥物對(duì)小鼠有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體及藥物代謝酶的影響.pdf

1、目的:
　　探討板藍(lán)根飲片水煎液、板藍(lán)根顆粒及其所含靛藍(lán)、靛玉紅對(duì)小鼠腎組織有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體中的2個(gè)主要亞型(Octs，Oct1、Oct2)及肝臟/小腸中與首過(guò)效應(yīng)相關(guān)聯(lián)的2種細(xì)胞色素氧化酶P450(CYP450，Cyp3a4、Cyp2e1)活性的影響。
　　方法:
　　板藍(lán)根飲片水煎液(DRI)低、高劑量組（1.6000、6.4000 g·kg-1，生藥量），板藍(lán)根顆粒（GRI）低、高劑量組（0.6150、2.460

2、0 g·kg-1），靛藍(lán)低、高劑量組(0.0080、0.6400 mg·kg-1)，靛玉紅低、高劑量組(0.0192、1.5360 mg·kg-1)等分別灌胃給予NIH小鼠（60只/組，雌雄各半），2次/d，連續(xù)5d。同時(shí)設(shè)置2種溶媒{純水、0.5％CMC（羧甲基纖維素鈉）}對(duì)照組，添加劑組-糊精加蔗糖（各1.5000 g·kg-1）和陽(yáng)性對(duì)照組-奎尼丁(0.0250 g·kg-1)。末次給藥60 min后全部受試小鼠逐一經(jīng)尾靜脈注射M

3、et（二甲雙胍，5 mg·kg-1），在注射探針?biāo)嶮et后1.0、2.5、5.0、7.5、10.0及20.0 min時(shí)分別從每組各取10只小鼠處死，收集全血并立即摘取右腎（供勻漿后測(cè)定其中Met蓄積量）。
　　另取NIH小鼠10只/組，雌雄各半，供試物分組同前，增設(shè)4個(gè)對(duì)照組:純水、0.5％CMC、酮康唑(24 mg·kg-1)、利福平組(40 mg·kg-1)，給藥同前，末次給藥60 min后處死，在冰上迅速摘取雙腎及肝臟、小腸

4、（左腎供提取總mRNA，右腎做腎切片攝取Met，肝臟/小腸用于測(cè)定Cyps酶活性）。
　　采用高速離心法制備腎組織/腎切片勻漿液，低溫差速離心法分離肝臟/小腸微粒體;高效液相色譜法定量小鼠血清、腎組織/腎切片勻漿液中Met濃度，紫外分光光度法檢測(cè)小鼠肝臟/小腸微粒體中Cyp3a4、Cyp2e1的酶活性，并以Fo1in-酚法測(cè)定腎組織/腎切片勻漿液、肝臟/小腸微粒體中蛋白含量，藥動(dòng)學(xué)軟件(DAS2.0)分析Met在血清、腎組織中的主

5、要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)(t1/2β、Vd、CL、AUC0-20 min);用各供試物高劑量組的小鼠左腎提取總mRNA，用RT-PCR（實(shí)時(shí)定量PCR）法考察小鼠腎組織Oct1、Oct2的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　與純水對(duì)照組比，0.5％CMC溶媒組和蔗糖加糊精添加劑組的各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均無(wú)差別(P＞0.05)。血清中Met的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)表明，板藍(lán)根水煎液高劑量組、板藍(lán)根顆粒高劑量組、靛藍(lán)高劑量組、靛玉紅高劑量組血液藥動(dòng)學(xué)參數(shù)均出現(xiàn)

6、顯著變化(P＜0.05，P＜0.01):t1/2β延長(zhǎng)了13％～97％，Vd減少了13％～72％，CL降低了9％～65％，AUC0-20 min增加了13％～135％;腎組織Met蓄積量顯著升高(P＜0.01);腎切片Met攝取量均不同程度降低(P＜0.05);腎組織Octs基因表達(dá)水平均被不同程度下調(diào)(P＜0.05)。
　　肝臟Cyp3a4酶活性測(cè)定結(jié)果顯示:以紅霉素為底物時(shí)板藍(lán)根類(lèi)各供試物組的Cyp3a4酶活性較對(duì)照組均顯著增

7、強(qiáng)(P＜0.01);以氨基比林為底物時(shí)，板藍(lán)根水煎液低和高劑量組、板藍(lán)根顆粒高劑量組、靛藍(lán)低和高劑量組、靛玉紅高劑量組的Cyp3a4酶活性較對(duì)照組均顯著增強(qiáng)(P＜0.01)。
　　腸道Cyp3a4酶活性測(cè)定結(jié)果顯示:以紅霉素為底物時(shí)，板藍(lán)根水煎液高劑量組、板藍(lán)根顆粒低和高劑量組、靛藍(lán)高劑量組、靛玉紅高劑量組的Cyp3a4酶活性較對(duì)照組均顯著增強(qiáng)(P＜0.01);以氨基比林為底物時(shí)，板藍(lán)根類(lèi)各供試物組的Cyp3a4酶活性較對(duì)照組均顯

8、著增強(qiáng)（P＜0.01）。
　　肝臟Cyp2e1酶活性測(cè)定結(jié)果顯示，板藍(lán)根水煎液高劑量組、板藍(lán)根顆粒低和高劑量組、靛藍(lán)低和高劑量組、靛玉紅高劑量組的酶活性較對(duì)照組均顯著增強(qiáng)(P＜0.05，P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　板藍(lán)根水煎液、板藍(lán)根顆粒、靛藍(lán)、靛玉紅在本試驗(yàn)所用劑量下對(duì)小鼠腎組織Oct1、Oct2均有不同程度的抑制作用;對(duì)肝臟/小腸Cyp3a4、Cyp2e1有不同程度的誘導(dǎo)作用，板藍(lán)根水煎液、板藍(lán)根顆粒的這種抑