蘇云金芽胞桿菌伴胞晶體蛋白對豬蛔蟲作用效果的研究.pdf

1、蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)伴胞晶體是廣泛使用的微生物殺蟲劑 ,與化學農藥相比較,由于其對脊柱動物無毒性而選擇性地作用于害蟲、對環(huán)境無污染且能通過轉基因技術應用于農作物而持久地發(fā)揮植物保護作用,這些毒素已被應用于有機農業(yè).近些年來的研究證實,其對動物寄生線蟲也有強效作用.尋找對豬蛔蟲敏感的Bt菌株并將其應用于動物臨床實踐是該研究的目的.有關Bt對豬蛔蟲的作用,國內外尚未見報道.豬蛔蟲卵在保濕防腐的

2、條件下,28℃培養(yǎng)28d,發(fā)育成感染性蟲卵.試驗小鼠和豬在感染前后飼喂不加任何驅蟲藥物的飼料.每只小鼠一次經口感染約4,000個蟲卵;每頭豬(40kg)經口感染6×10<'5>個蟲卵.試驗豬被成功地復制出了豬蛔蟲病,表現(xiàn)出了豬蛔蟲病的臨床癥狀;60d后對豬糞便進行檢查,每克糞便中蟲卵數(shù)高達7,100個,成功地復制出來豬蛔蟲病理模型.該試驗成功地在體外分離到了豬蛔蟲第二期幼蟲、第三期幼蟲和第四期幼蟲,為以后的實驗打了良好的基礎.試驗小鼠在

3、感染后第6d迫殺取肺臟,收集第四期幼蟲(L4),用DMEM培養(yǎng)基配制成懸浮液,并定量至200~250條L4/ml.將Bt007、017、021、027、032、037、H<,14>和HD<,1>等八個菌株進行培養(yǎng),提取伴胞晶體,堿溶提取蛋白質,測定晶體蛋白含量.根據(jù)以上結果,選擇017菌株大量培養(yǎng),提取伴胞晶體蛋白,測定蛋白含量;將晶體蛋白冷凍干燥,定量制成腸溶膠囊;腸溶膠囊經口給豬投服,每日測定每克豬糞便中的豬蛔蟲卵數(shù),計算百分率(以

4、給藥前糞便中的蟲卵數(shù)為100﹪計),制作曲線并進行統(tǒng)計分析,研究其對活豬體內蛔蟲的作用效果.對豬TP、ALB、ALT、AST、ALP、CK-NAC、CR、CHOL、LDH-L、Glu、Urea等十一項臨床生物化學指標研究顯示,該伴胞晶體蛋白腸溶膠囊對豬血液生化指標的改變不顯著(P>0.05),未見有任何臨床癥狀,懷孕母豬沒有出現(xiàn)流產征兆,后期跟蹤無不良反應,說明其對豬的心功能、肌肉、肝臟、腎臟、消化吸收、代謝及繁殖等沒有顯著影響,沒有誘