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1、遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文七鰓鰻Lcklike的克隆表達及生物信息學(xué)分析姓名:戴鵬申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:李慶偉201205七鰓鰻Lck—like的克隆、表達與生物信息學(xué)分析Cloning,ExpressionandBioinformaticsAnalysisofLcklikegenefromLampetrajaponicaAbstractLymphocyte—specificproteintyrosinekinase
2、(Lck)isanimportantkindofSRCfamilyproteintyrosinekinase(PTK)thatiswidelyexpressedinorganismsItistheprimarysignaldownstreamactivatedbyTCRandinvolvedinphosphorylationofproteinmoleculesduringtheprocessofsignaltransductionThe
3、researchshowsthatLckplaysaveryimportantroleinmediatingTCRsignaltransductionandthedevelopment,differentiation,proliferationandactivationofTcellsLampetraaponica,astheinterimspeciesofinvertebratesandvertebrates,isregardedas
4、thenewmodelorganismtostudytheoriginandevolutionofvertebratesThecurrentstudyonLckmainlyfocusesonmammalswhileitiSstillunknownwhetherLckcanbefoundinLampetraiaponica,themostancientjawlessvertebrateInthispaper,withthehelpofmo
5、lecularbiologyandbioinformaticsmeasures,apieceofsequencethatiShomologouswithLckhasbeenfoundinthelabbuiltbloodcDNAlibraryofLampetrajaponica,thenweproceededwithgenecolone,expressionandbioinformaticsanalysis,whichmighthelpU
6、StomakefurtherstudyontheoringinandevolutionofLckproteininvertebratesandthesignaltransductionpathwayofLck—mediatedLampetrajaponicaatthemolecularlevelInthisstudy,apieceofESTsequencethatishighlyhomologouswithSRCfamilykinase
7、hasbeenfoundinthelab—builtbloodcDNAlibraryofLampetrajaponicaaftersearchingmorethan3300piecesofESTsequencesAftermakinghomologyanalysis,wefoundthispieceofESTsequencehighlyhomologouswiththeORF3’terminalsequenceofSRClikegene
8、inLampetrareissneriAccordingtothestructurefeaturesofparticulargene,wedesignedtheprimer,splicedfollowing3’RACE,5’RACEandthesequencingresult,andsuccessfullygetthefulllengthofcDNAofLcklikeinLampetrajaponicaThrogghcomparingw
9、iththeprimarysequenceofLckaminoacidinspeciesofdifferentstagesfromlowertohigherlevel,thephylogenetictreehasbeenconstructedbasedonneighbouringandothermethodsFurthermore,wealsoanalyzedthesecondarystructure,predictedtheterti
10、arystructure,thehydrophilicity,thedisulfidebond,theantigenicepitopeandthedistributionofconservedmotifThropghperformingRealTimePCRassaywedesignedspecififiedprimerandsetG么PD日asinternalcontrolgeneWeanalyzedtherelativeexpres
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