VEGF反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染對(duì)膽囊癌腫瘤血管生成影響的研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文VEGF反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染對(duì)膽囊癌腫瘤血管生成影響的研究姓名：李海軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師：彭淑牖20050110李海軍浙江大學(xué)博士學(xué)位論文達(dá)吣“1。VEGFmRNA在腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，內(nèi)皮細(xì)胞不表達(dá)VEGF，但腫瘤肉皮細(xì)胞過(guò)度表達(dá)F1t—lmRNA和KDRmRNA，說(shuō)明VEGF主要是旁分拙。由于在原發(fā)性膽囊癌中的相關(guān)報(bào)道少，且結(jié)果并不一致，所以本文的第一部分就膽裳癌VEGF及其受體Flt1和

2、KDR表達(dá)情況以及與臨床病理特征的關(guān)系進(jìn)行了研究。隨著分子生物學(xué)和遺傳工程的發(fā)展，基因治療得到廣泛的肯定，其中包括反叉核酸技術(shù)。早在1984年，Johnathan等就報(bào)道了用反義RNA抑制TK基因的表達(dá)取得了良好的效果【12】。反義寡核苷(anfisenseoligodeoxynucleotides，ASODN)是能與特定的DNA或RNA以堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式結(jié)合，并阻止其轉(zhuǎn)錄和翻譯的短核酸片段，是目前迅速發(fā)展的新型的基因治療藥物[131

3、。陽(yáng)離子脂質(zhì)體(cationicliposomes)自g&帶負(fù)電荷的核酸物質(zhì)形成復(fù)合物，可提高細(xì)胞對(duì)ASODN的攝人，增加生物利用度，同時(shí)可在一定程度上降低核酸酶對(duì)其的降解，在基因治療中具有獨(dú)特的應(yīng)用價(jià)值[1415]。oligofectamine是一種新型的專門用于寡核苷酸轉(zhuǎn)染的陽(yáng)離子脂質(zhì)體，其效率高于市售的Lipofectamine[16171。目前國(guó)內(nèi)外尚未見VEGFASODN在膽囊癌方面的基因治療方面的報(bào)道，本文的第二、第三舌F分

4、就是利用oligofectamine介導(dǎo)的VEGFASODN轉(zhuǎn)染人膽囊癌細(xì)胞GBC—SD的體外和體內(nèi)研究，探討VEGFASODN對(duì)VEGF、Fit1和KDR在nkRNA和蛋白水平表達(dá)的影響，以及對(duì)腫瘤生長(zhǎng)、增殖凋亡和血管生成的影響，以期為將來(lái)采用VEGFASODN對(duì)膽囊癌進(jìn)行基因治療積累理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。參考文獻(xiàn)1CaoYH，0’ReillyMS，MarsnallB，eta1ExpressionofangiostatineDNAina

5、murinefibrosarcomasuppressesprimarytumorgrowthandproducelong—termdormancyofmetastasis[J]JClinInvest，1998，101：10552RiedelEGotteK，BerlerW：eta1Inversecorrelationofapoptoticandangiogenticmarksinsquamouscelleareinomaofthehead

6、andneck[J]0ncolRep，2001，8(3)：471—4763LukitsJ，TimarJ，JuhaszA，eta1ProgressiondifferencebetweencancersofthelarynxandhypopharynxisnotduetotumorsizeandVascularization[J]Otolarygol，2001，125(1)：18224RisauWWhat，ifanything，isanan