血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子反義寡核苷酸聯(lián)合血管生成素-1對(duì)大鼠糖尿病視網(wǎng)膜病變的影響.pdf

1、目的：觀察血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)反義寡核苷酸(ASODN)聯(lián)合血管生成素-1(Ang-1)對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠視網(wǎng)膜滲漏及新生血管生成的影響。
　　 方法：選取健康雄性SD大鼠80只，其中隨機(jī)抽出5只作為正常對(duì)照組(A組)，再將剩余75只大鼠分別按照60mg/Kg一次性左下腹腹腔注射濃度為1％的鏈脲佐菌素(STZ)溶液，24小時(shí)后經(jīng)尾靜脈采血測(cè)血糖，將血糖≥16.7mmol/L的大鼠定為糖尿病大鼠模型；將糖尿病造模成功的

2、大鼠再飼養(yǎng)5個(gè)月行眼底血管熒光造影檢查(FFA)，確定糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)大鼠模型且病變程度相仿的大鼠，隨機(jī)抽取其中45只共分為五組：DR對(duì)照組(B組)5只，PBS緩沖液對(duì)照組(C組)10只，VEGF ASODN干預(yù)組(D組)10只，Ang-1干預(yù)組(E組)10只，聯(lián)合干預(yù)組(F組)10只。C組玻璃體腔注射PBS緩沖液5μl；D組玻璃體腔注射濃度為100μmol/L的VEGF ASODN溶液5μl；E組玻璃體腔注射濃度為160μg/

3、ml的Ang-1溶液5μl；F組玻璃體腔注射100gmol/L的VEGFASODN溶液5μl及160μg/ml的Ang-1溶液5μl；三天后再次行上述操作。再隔三天后行眼底血管熒光造影檢查(FFA)，對(duì)比觀察不同組別大鼠視網(wǎng)膜滲漏情況；同時(shí)處死大鼠摘出眼球行病理組織切片光學(xué)顯微鏡下觀察視網(wǎng)膜新生血管芽細(xì)胞核數(shù)。
　　 結(jié)果：1.眼底血管熒光造影：玻璃體腔注藥后A、B、C、D、E和F各組視網(wǎng)膜平均新生血管滲漏面積(mm2)分別為：

4、0、4.53±0.71、4.46±0.62、3.14±0.22、3.34±0.26、1.53±0.24；正常對(duì)照組(A組)未見(jiàn)視網(wǎng)膜滲漏，與DR對(duì)照組(B組)、PBS緩沖液對(duì)照組(C組)、VEGF ASODN干預(yù)組(D組)、Ang-1干預(yù)組(E組)、聯(lián)合干預(yù)組(F組)比較差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；DR對(duì)照組(B組)與PBS緩沖液對(duì)照組(C組)之間平均熒光滲漏面積未見(jiàn)明顯異常，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；VEGF ASO

5、DN干預(yù)組(D組)、Ang-1干預(yù)組(E組)、聯(lián)合干預(yù)組(F組)平均熒光滲漏面積低于DR對(duì)照組(B組)、PBS緩沖液對(duì)照組(C組)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；聯(lián)合干預(yù)組(F組)平均熒光滲漏面積低于VEGF ASODN干預(yù)組(D組)、Ang-1干預(yù)組(E組)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 2.光學(xué)顯微鏡下觀察：A、B、C、D、E和F各組突破內(nèi)界膜的平均血管芽細(xì)胞核數(shù)(個(gè))分別為：1.13±0.31、80.3

6、1±5.21、81.08±2.57、37.37±3.41、41.07±2.09、14.41±1.23；正常對(duì)照組(A組)視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)清晰，排列整齊，形態(tài)相似，視網(wǎng)膜偶見(jiàn)突破內(nèi)界膜的血管芽細(xì)胞核，與DR對(duì)照組(B組)、PBS緩沖液對(duì)照組(C組)、VEGF ASODN干預(yù)組(D組)、Ang-1干預(yù)組(E組)、聯(lián)合干預(yù)組(F組)比較差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；DR對(duì)照組(B組)或PBS緩沖液對(duì)照組(C組)視網(wǎng)膜均可見(jiàn)大量突破內(nèi)界膜

7、的血管芽細(xì)胞核，血管明顯擴(kuò)張，視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)及細(xì)胞排列明顯紊亂，視網(wǎng)膜組織水腫，兩者間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；VEGF ASODN干預(yù)組(D組)、Ang-1干預(yù)組(E組)、聯(lián)合干預(yù)組(F組)突破內(nèi)界膜的血管芽細(xì)胞核數(shù)均低于DR對(duì)照組(B組)、PBS緩沖液對(duì)照組(C組)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；聯(lián)合干預(yù)組(F組)突破內(nèi)界膜的血管芽細(xì)胞核數(shù)低于VEGF ASODN干預(yù)組(D組)、Ang-1干預(yù)組(E組)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)