版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、背景與目的: 人微小病毒B19(Human Parvovirus B19)是目前已知的微小病毒科微小病毒屬中唯一使人類(lèi)致病的病毒,也是動(dòng)物病毒中體積最小結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的DNA病毒。主要經(jīng)呼吸道和血液途徑傳播,可引起社區(qū)局部流行。自1990年首次證實(shí)我國(guó)存在該病毒感染后,陸續(xù)報(bào)告B19病毒是我國(guó)孕婦非免疫性流產(chǎn)、兒童急性再障危象、急性血小板減少性紫癜等疾病的重要病因之一。孕婦感染B19病毒者較容易通過(guò)垂直傳播,導(dǎo)致胎兒水腫、自然流產(chǎn)及
2、死胎。而在我國(guó),多數(shù)婦女血清中缺少保護(hù)性抗體,易發(fā)生該病毒的感染?,F(xiàn)在一般診斷B19病毒感染多采用PCR與ELISA抗體檢測(cè)結(jié)合的方法。在鄭州地區(qū),孕婦感染人微小病毒B19的情況尚無(wú)人報(bào)道。而且,國(guó)內(nèi)尚無(wú)B19病毒全基因序列的報(bào)道,對(duì)B19病毒序列分析也不多,我國(guó)B19流行株與國(guó)外B19病毒標(biāo)準(zhǔn)株基因差異的參考數(shù)據(jù)也不甚充足。因此,本研究應(yīng)用ELISA與PCR方法分別檢測(cè)血清B19 lgM抗體、B19 IgG抗體和B19-DNA,從而對(duì)
3、該地區(qū)孕婦感染人微小病毒B19做出判斷。同時(shí),從B19病毒感染流產(chǎn)的孕婦血清中,用PCR方法擴(kuò)增并克隆出病毒全基因,進(jìn)行序列分析,為國(guó)內(nèi)B19病毒序列分析提供該地區(qū)的數(shù)據(jù)資料。 方法: 將收集的29例不明原因流產(chǎn)或死胎孕婦的血清設(shè)為觀察組,237例正常孕婦血清作為對(duì)照組。使用ELISA方法分別檢測(cè)血清標(biāo)本中的B19 IgG和IgM;提取血清標(biāo)本。DNA,以其為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)病毒感染情況。并利用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行
4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 根據(jù)GenBank發(fā)表B19的全基因序列(NC_000883)設(shè)計(jì)7對(duì)重疊序列引物,所設(shè)計(jì)合成的重疊引物對(duì)應(yīng)擴(kuò)增序列的總合囊括了參考序列的全序列;利用PCR和分子克隆鄭州地區(qū)孕婦感染B19病毒的調(diào)查和分離株全基因克隆及序列分析技術(shù),從B19陽(yáng)性的流產(chǎn)感染者血清標(biāo)本中分別擴(kuò)增出預(yù)期B19病毒的7個(gè)互相重疊的區(qū)段:將其分別與pGEM-Teasy載體連接,轉(zhuǎn)化入JM109大腸桿菌中,利用氨芐青霉素抗性、藍(lán)白篩選篩選出陽(yáng)性
5、克隆,并以PCR方法對(duì)陽(yáng)性菌落進(jìn)行鑒定,從而構(gòu)建出含B19病毒全基因的T載體克隆,并送測(cè)序分析。 結(jié)果: 1.29例不明原因流產(chǎn)或死胎孕婦血清B19 IgG、B19 IgM陽(yáng)性率分別為51.7%(15/29)、6.9%(2/29),237例正常孕婦對(duì)照組血清B19:lgG、B19 IgM陽(yáng)性率分別為30.4%(72/237)、6.9%(2/29)。 2.29例不明原因流產(chǎn)或死胎孕婦血清中B19-DNAPCR檢測(cè)陽(yáng)
6、性率為13.8%(4/29);對(duì)照組檢測(cè)陽(yáng)性率2.5%(6/237)。 3.分別成功構(gòu)建含有B19病毒7個(gè)互相重疊的片段的T載體重組克隆質(zhì)粒。 4.鄭州市B19病毒分離株與GenBank NC_000883比較顯示僅有10個(gè)核苷酸的不同,可導(dǎo)致2個(gè)不重要編碼氨基酸的改變。 結(jié)論: 血清中B19 IgG、IgM、B19-DNA陽(yáng)性率與國(guó)內(nèi)外報(bào)道基本一致。鄭州地區(qū)孕婦中存在人微小病毒B19的感染。 鄭
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 人細(xì)小病毒B19中國(guó)株NS蛋白基因克隆及序列分析.pdf
- 人細(xì)小病毒B19中國(guó)株VPI蛋白獨(dú)特區(qū)基因片段克隆及序列分析.pdf
- 一株B亞型ALV的分離、前病毒全基因組序列分析和感染性克隆的構(gòu)建.pdf
- 馬鈴薯S病毒內(nèi)蒙古分離株全基因組克隆及序列分析.pdf
- 豬嵴病毒W(wǎng)UH1株全基因組序列分析及病毒的分離.pdf
- 馬鈴薯卷葉病毒中國(guó)株基因組全序列及馬鈴薯S病毒內(nèi)蒙分離株3'端序列的分析.pdf
- 豬Ⅱ型圓環(huán)病毒浙江分離株的全基因組克隆及感染性克隆的構(gòu)建.pdf
- 一株O型口蹄疫病毒分離株的全基因序列分析.pdf
- 鴨瘟病毒河南分離株gG基因與gI基因的克隆與序列分析.pdf
- 乙型腦炎病毒重慶分離株CQRC-02prM-E基因的克隆和序列分析.pdf
- 內(nèi)源性綿羊肺腺瘤病毒NM株全基因序列的克隆、序列分析.pdf
- 不同宿主感染REV情況調(diào)查及分離株gp90基因序列分析.pdf
- 鄭州地區(qū)孕婦和兒童人巨細(xì)胞病毒感染情況的調(diào)查研究.pdf
- 一株鵝呼腸孤病毒的分離鑒定及全基因組序列分析.pdf
- 牛腺病毒2型中國(guó)分離株的鑒定及全基因組序列分析.pdf
- 55757.凡株不同宿主副粘病毒的分離鑒定和f基因的克隆與序列分析
- HBsAg和B19 VP2復(fù)合抗原的基因克隆及表達(dá).pdf
- 微病毒b19感染性風(fēng)濕病
- 外源性綿羊肺腺瘤病毒NM株的基因克隆及序列分析.pdf
- 中國(guó)不同地區(qū)A、B組輪狀病毒分離株VP7基因序列的比較分析.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論