不同宿主感染REV情況調(diào)查及分離株gp90基因序列分析.pdf

1、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥（Reticuloendotheliosis，RE）是指由網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒(Reticuloendotheliosis virus，REV)引起的禽類的一種重要的免疫抑制病和致瘤性疾病，包括急性網(wǎng)狀細胞腫瘤、生長抑制、淋巴組織和其他組織慢性腫瘤形成的病理綜合癥。REV不僅可以單獨使禽類致病，也可與其他疾病混和感染，降低禽類對其他疾病的抵抗力，給禽類養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。REV的常見宿主為雞、鴨等家禽，同時REV亦

2、可感染野生鳥類。
　　為了解不同宿主對REV的感染情況，從全國各地采集了不同宿主來源的樣品1563份，對其進行初步PCR檢測，從不同宿主來源的樣品中得到68份陽性樣品，將陽性樣品適當處理后接種DF-1細胞，利用IFA、PCR復檢等方法檢測后得到7株REV分離株，分別為CH120057株、CH120099株、CH120220株、CH120276株、CH120277株、WB11042株和WB11043株。分別從不同宿主陽性檢出率和分離

3、率、不同品種的雞陽性檢出率、不同品種的野鳥的陽性檢出率和不同品種的水禽檢出率4個角度對不同宿主來源感染REV的情況進行分析，推斷得出雞仍是REV的主要宿主。由實驗數(shù)據(jù)我們分析推測不同品種的雞樣品中蛋雞可能比其他品種的雞更易感染REV，其次是肉雞;小型雀形目鳥類比雁鴨類野鳥陽性感染率高;與鵝相比，鴨子是目前我國水禽類REV的主要宿主。
　　以所分離的REV的病毒全基因組cDNA為模板，用REV特異性引物擴增gp90基因片段。PCR產(chǎn)

4、物經(jīng)回收、純化后，克隆至pMD-18T載體，隨機選取3個陽性克隆進行測序。測序結果表明分離的7株REV的gp90基因閱讀框架全長均為1191bp，編碼397氨基酸，未出現(xiàn)任何缺失和插入。通過遺傳進化樹分析結果顯示，CH120057株、WB11043株、CH120057株在同一支上，同另一支上的CH120220株、CH12076株與ZD0708株親緣關系較近，可能與ZD0708株存在共同祖先，gp90基因目前較保守還未出現(xiàn)較嚴重的突變，但