豬傳染性胃腸炎病毒四川分離株的分離鑒定及S基因片段克隆和序列分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、將疑似傳染性胃腸炎病豬的糞便病料進行處理后，接種于豬睪丸傳代細胞(ST)中觀察，得到穩(wěn)定的細胞病變。通過核酸類型實驗、脂溶劑敏感性實驗，顯示該病毒為有囊膜的RNA病毒；使用電子顯微鏡觀察病毒形態(tài)，可以看到直徑大小約90nm的病毒粒子；通過中和實驗，將病毒細胞接種液和豬傳染性胃腸炎病毒兔高免血清發(fā)生中和反應，得到了較高的中和滴度。結果表明成功地分離并鑒定了一株傳染性胃腸炎病毒，并命名為TGEVSC-A。　　根據(jù)GenBank報道的豬傳染

2、性胃腸炎序列，設計包含TGEV的S基因1760bp的部分片段的一對引物。通過RT-PCR技術擴增，得到了一條約1.8kb序列，通過低熔點瓊脂糖純化回收該片段后，將此片段連接在pDM18-T載體上，轉化DH5a大腸桿菌，使用雙酶切和PCR法對重組質粒進行鑒定后，將重組質粒送大連寶生物公司測序?！　⊥ㄟ^DNAstar軟件的同源性搜索和多重序列比較分析，結果顯示四川株TGEV與國外報道的部分TGEV病毒分離株具有較高的同源性，并且其保守序列

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