草莓鑲脈病毒PCR檢測體系優(yōu)化及草莓病毒脫除方法研究.pdf

1、　　草莓是無性繁殖的多年生草本植物，容易受到病毒的侵染，病毒病對草莓生產(chǎn)危害嚴重。本研究旨在優(yōu)化草莓鑲脈病毒的PCR檢測體系，并利用PCR檢測病毒技術(shù)研究草莓病毒的脫除方法和效率，主要結(jié)果如下：　　1.利用改進CTAB法從草莓葉片中提取出優(yōu)質(zhì)的總DNA，可以穩(wěn)定地對草莓植株中的SVBV進行檢測。　　2.對PCR檢測草莓植株中SVBV的反應(yīng)體系進行了優(yōu)化。　　3.20μLPCR反應(yīng)液中包含0.001μL總DNA時能擴增出SVBV特異

2、譜帶，相當于能夠從不足1μg的草莓新鮮葉片中檢測出SVBV。　　4.對從愛美、芳玉、明磊、布蘭登堡、高斯克、威斯塔爾、春香、全明星、寶交早生、甜心等10個草莓品種及東北草莓、綠色草莓2個野生草莓資源上擴增出的SVBV特異產(chǎn)物進行了回收、克隆和測序，所有的擴增片段大小均為預(yù)期的574bp，BLAST分析表明SVBV中國分離物外殼蛋白基因與GenBank中SVBV分離物(NC-01725)外殼蛋白基因的序列同源性為89％～93％，各個SV

3、BV中國分離物在外殼蛋白基因序列上也存在著一定的差異。　　5.基于對SVBV中國分離物外殼蛋白基因的序列分析比較，設(shè)計并篩選出了檢測SVBV的理想引物I2/SM2?！　?.以帶有SVBV、SMYEV、SMoV的草莓品種寶交早生和僅帶有SVBV的草莓品種全明星的匍匐莖為試材進行莖尖培養(yǎng)脫毒的研究。　　7.以帶有SVBV、SMYEV、SMoV的草莓品種寶交早生和僅帶有SVBV的草莓品種全明星的試管苗為試材進行熱處理脫毒的研究，結(jié)果表明