20（S）-人參皂苷Rg-,3-抗腦缺血作用研究.pdf

1、腦缺血是嚴(yán)重危害公眾健康的常見(jiàn)病與多發(fā)病，迄今尚無(wú)理想的治療藥物。腦ATP敏感性鉀通道偶聯(lián)神經(jīng)元的興奮性和能量代謝，是神經(jīng)元保護(hù)劑作用的靶點(diǎn)之一。20(S)-人參皂苷Rg3是從傳統(tǒng)中藥人參中分離提取得到的四環(huán)三萜類(lèi)人參二醇型皂苷化合物，也是山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心開(kāi)發(fā)研制的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的治療缺血性腦中風(fēng)“一類(lèi)”新藥(中藥)。本文研究了20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)缺血性腦損傷的保護(hù)作用并探討了其可能的作用機(jī)制。 一、20

2、(S)-人參皂苷Rg3對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血損傷的保護(hù)作用在大鼠全腦缺血再灌注損傷模型、局灶性腦缺血模型上觀察20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)動(dòng)物缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20(S)-人參皂苷Rg3能夠顯著降低腦神經(jīng)細(xì)胞壞死、凋亡，縮小腦梗塞面積，降低腦水腫程度，改善神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能障礙。表明20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)動(dòng)物缺血性腦損傷具有明顯的保護(hù)作用。二、20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)自由基氧化損傷的影響 采用NADH-PMS-NB

3、T系統(tǒng)產(chǎn)生O·2-和EDTANa2-Fe(Ⅱ)-H2O2產(chǎn)生·OH來(lái)觀察20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)氧自由基生成的影響，并利用Fe2++VitC系統(tǒng)產(chǎn)生的·OH誘導(dǎo)大鼠腦突觸體損傷來(lái)觀察20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)氧自由基氧化損傷的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20(S)-人參皂苷Rg3在體外不能影響氧自由基的生成，但是對(duì)自由基誘導(dǎo)的大鼠腦突觸體氧化損傷有顯著的保護(hù)作用。 三、20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸所致神經(jīng)細(xì)胞損傷

4、的保護(hù)作用在NMDA誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠神經(jīng)元損傷模型上觀察20(S)-人參皂苷Rg3的神經(jīng)保護(hù)作用并與NMDA受體特異性抑制劑MK-801做了對(duì)比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20(S)-人參皂苷Rg3和MK-801對(duì)NMDA誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷均有明顯的保護(hù)作用，ATP依賴(lài)性鉀通道特異性抑制劑格列苯脲不影響MK-801的神經(jīng)保護(hù)作用但是可以逆轉(zhuǎn)20(S)-人參皂苷Rg3的神經(jīng)保護(hù)作用。表明20(S)-人參皂苷Rg3可以抑制NMDA誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷，但是作用機(jī)理與M

5、K-801不同，不是作用于NMDA受體。 四、20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)腦缺血所致大鼠腦線(xiàn)粒體損傷的保護(hù)作用在大鼠局灶性腦缺血導(dǎo)致腦神經(jīng)細(xì)胞線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)功能損傷模型上觀察20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)腦神經(jīng)元線(xiàn)粒體超微結(jié)構(gòu)，膜結(jié)構(gòu)和功能，線(xiàn)粒體呼吸功能的影響，結(jié)果顯示20(S)-人參皂苷Rg3能顯著抑制缺血腦線(xiàn)粒體膜流動(dòng)性的降低，膜磷脂降解，減少腦缺血引起的線(xiàn)粒體腫脹，抑制NADH脫氫酶、琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C氧化酶活性的降低，

6、改善線(xiàn)粒體呼吸功能，降低腦缺血大鼠神經(jīng)元線(xiàn)粒體MDA含量、升高SOD活性、抑制Ca2+過(guò)多攝入。表明20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)神經(jīng)元線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)功能的損傷有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制Ca2+內(nèi)流，阻斷自由基氧化損傷的作用有關(guān)。 五、20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)腦血流的影響及其血管藥理學(xué)研究觀察20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)麻醉Beagle犬腦血管血流和彌散性腦缺血大鼠皮層組織血流的影響，并在體外制備犬離體基底動(dòng)脈血管條從內(nèi)皮

7、系統(tǒng)、α受體和鉀通道三方面研究并探討了20(S)-人參皂苷Rg3的舒血管機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20(S)-人參皂苷Rg3可以顯著增加麻醉Beagle犬腦血管血流、腦缺血大鼠海馬組織血流。20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)完整內(nèi)皮、去內(nèi)皮基底動(dòng)脈血管條均有明顯的舒張作用，但是對(duì)二者的作用強(qiáng)度不同，20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)去內(nèi)皮基底動(dòng)脈血管條的舒張作用弱于完整內(nèi)皮血管條，量效曲線(xiàn)右移，提示20(S)-人參皂苷Rg3的舒張血管作用部分依賴(lài)于血管內(nèi)皮。2

8、0(S)-人參皂苷Rg3能夠抑制去氧腎上腺素和30mmol·L-1KCl所致的血管收縮，而格列苯脲能夠抑制20(S)-人參皂苷Rg3的舒血管作用，表明20(S)-人參皂苷Rg3的舒血管作用與開(kāi)放ATP依賴(lài)性鉀通道有關(guān)。 六、20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)腦神經(jīng)細(xì)胞鈉、鉀、鈣通道電流的影響采用培養(yǎng)神經(jīng)元全細(xì)胞記錄觀察20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)腦神經(jīng)細(xì)胞鈉、鉀、鈣通道電流的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)神經(jīng)元鈉電流和鈣電

9、流的電流峰值均無(wú)明顯作用，但是可以顯著增加外向鉀通道電流，并被格列苯脲完全阻斷。表明20(S)-人參皂苷Rg3可以選擇性激活A(yù)TP依賴(lài)性鉀通道。 結(jié)論：20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)動(dòng)物缺血性腦損傷具有確切的保護(hù)作用。抑制神經(jīng)元及線(xiàn)粒體Ca2+超載，保護(hù)興奮性氨基酸受體誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷，拮抗腦缺血后自由基的氧化損傷，改善神經(jīng)細(xì)胞線(xiàn)粒體能量代謝，擴(kuò)張腦血管增加腦血流可能是其發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的重要途經(jīng)，其作用機(jī)制可能與開(kāi)放神經(jīng)元、線(xiàn)粒