谷氨酸誘導(dǎo)PC12細(xì)胞Aβ生成機(jī)制與人參皂苷Rg-,2-的干預(yù).pdf

1、　　目的；采用細(xì)胞培養(yǎng)加入谷氨酸的方法造成PC12細(xì)胞興奮毒性損傷模型，研究興奮性毒性損傷后細(xì)胞存活率、自由基生成、細(xì)胞內(nèi)游離鈣含量及相關(guān)蛋白calpainⅡ、caspase-3和Aβ表達(dá)的變化，并探討人參皂苷Rg2對谷氨酸誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞毒性損傷的干預(yù)機(jī)制。　　方法：利用PC12細(xì)胞株，采用細(xì)胞培養(yǎng)的方法，加入含1mmol/L谷氨酸的無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后即造成興奮毒性損傷，給藥組在損傷同時加入不同濃度的人參皂苷Rg2，并與藥物

2、尼莫地平(鈣拮抗劑)進(jìn)行對照。用生化方法測定MTT代謝率、NO(硝酸還原酶法)和MDA(硫酸巴比妥法)含量；Fura-2作為Ca2+指示劑，利用熒光分光光度計測定細(xì)胞內(nèi)游離鈣含量；免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測PC12細(xì)胞內(nèi)calpainⅡ、caspase-3及Aβ的表達(dá)?！　〗Y(jié)論：谷氨酸毒性損傷后，PC12細(xì)胞MTT代謝率降低，并引起細(xì)胞內(nèi)鈣內(nèi)流增多，而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載，誘導(dǎo)calpainⅡ的過度表達(dá)；同時NO、MDA等自由基產(chǎn)生增多；激活c