阿司匹林對(duì)培養(yǎng)的HSC-T6細(xì)胞增殖與活化的影響及分子機(jī)制研究.pdf

1、目的: 采用不同濃度的阿司匹林干預(yù)體外培養(yǎng)的HSC-T6細(xì)胞，探討阿司匹林對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖與活化的影響及相關(guān)機(jī)制，為阿司匹林臨床新的應(yīng)用提供進(jìn)一步理論依據(jù)。
　　 方法: 將HSC-T6細(xì)胞培養(yǎng)于含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。采用MTT法測(cè)阿司匹林不同濃度組(1，5，10，15mmol/L)對(duì)細(xì)胞增殖情況的影響，光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察各組HSC-T6細(xì)胞形態(tài)。根據(jù)結(jié)果將后續(xù)試驗(yàn)分為對(duì)照組、低、

2、中、高阿司匹林組(1，3，5mmol/L)干預(yù)體外培養(yǎng)的HSC-T6細(xì)胞24h、48h、72h小時(shí)后，用RT-PCR法檢測(cè)α-SMA、ColⅠmRNA、COX-2、NF-κB、PPAR-γ的表達(dá)。1μmol/L LPS組、不同濃度的ASA(1，3，5mmol/L)+1μmol/L LPS干預(yù)HSC-T6細(xì)胞24h，用RT-PCR法測(cè)定各組COX-2、NF-κB、PPAR-γ的mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.阿司匹

3、林對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖的影響
　　 阿司匹林對(duì)體外培養(yǎng)的HSC-T6細(xì)胞增殖有抑制作用，且隨著時(shí)間、劑量的增加，其抑制率也增加;在作用24h內(nèi)，濃度分別為1，5mmol/L時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖受抑制不明顯(P＞0.05);作用48h、72h后，阿司匹林能明顯抑制HSC-T6細(xì)胞增殖，存在時(shí)間和濃度依賴(lài)性。
　　 2.阿司匹林對(duì)HSC-T6細(xì)胞α-SMA、ColⅠ、COX-2、NF-κB、PPAR-γmRNA表達(dá)的影響

4、　　 (1)不同濃度ASA分別干預(yù)HSC-T6細(xì)胞24h，48h，72h，α-SMA、ColⅠ、COX-2、NF-κBmRNA表達(dá)均明顯降低，與對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，且隨濃度的增加降低更明顯，組間比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 (2)不同濃度ASA分別干預(yù)HSC-T6細(xì)胞，24h組和48h組，PPAR-γ mRNA表達(dá)升高，與各自對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，隨濃度的增加升高更明顯，組間比

5、較P＜0.05;72h組:1mmol/L與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異P（P＞0.05），與3mmol/L和5mmol/L相比有顯著性差異(P＜0.05)，3mmol/L和5mmol/L與對(duì)照組相比有顯著性差異（P＜0.05），但兩組間相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。
　　 (3)α-SMA/PPAR-γ相對(duì)表達(dá)量明顯降低，與對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，且隨濃度的增加降低更明顯，組間比較有顯著性差異（P＜0.05）。

6、r>　　 3.阿司匹林聯(lián)合LPS對(duì)HSC-T6細(xì)胞COX-2、NF-κB、PPAR-γ mRNA表達(dá)的影響
　　 (1)在LPS刺激下，與對(duì)照組相比，LPS組COX-2、NF-κ BmRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)(P＜0.05)，濃度(1mmol/L，3mmol/L) ASA+LPS組COX-2、NF-κBmRNA表達(dá)同樣增強(qiáng)，與對(duì)照組相比P＜0.05;但增加的COX-2、NF-κBmRNA被ASA部分抑制，且隨著ASA濃度的增加抑制程

7、度增強(qiáng)，與LPS組相比P＜0.05。
　　 (2)在LPS刺激下，與對(duì)照組相比，LPS組可明顯增強(qiáng)PPAR-γmRNA表達(dá)(P＜0.05)，ASA+LPS組可明顯增強(qiáng)PPAR-γmRNA表達(dá)，與對(duì)照組和LPS組相比均P＜0.05，且隨著ASA濃度的增加，PPAR-γmRNA表達(dá)明顯增加。
　　 結(jié)論:
　　 1.阿司匹林能抑制HSC-T6細(xì)胞增殖。
　　 2.阿司匹林能降低肝纖維化指標(biāo)α-SMA、ColⅠ