丹參素、黃芪對大鼠肝星狀細胞株(HSC-T6)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響.pdf

1、目的：以轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）刺激大鼠肝星狀細胞株（HSC-T6）為實驗對象，了解丹參素、黃芪對HSC-T6的TGF-β/TβR/Smads信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用，探討丹參素、黃芪抗肝纖維化的機制。
　　 方法：丹參素、黃芪作用傳代培養(yǎng)的大鼠肝星狀細胞HSC-T6。MTT法檢測藥物對HSC-T6生長增殖的影響，了解藥物對TGF-β1刺激的HSC-T6增殖影響；免疫細胞化學(xué)染色法觀察HSC-T6細胞株α-SMA的表達，以及H

2、SC-T6細胞株Ⅰ、Ⅲ型膠原的合成；ELISA法觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原分泌；HSC-T6細胞膜上的TβRⅠ、Ⅱ的表達用間接免疫熒光及Western blot法觀察；RT-PCR法分析丹參素、黃芪和TGF-β1共同作用HSC-T6后，Smad2、3、7mRNA的表達變化。
　　 結(jié)果：（1）丹參素和黃芪在0.0125mg/ml～0.2mg/ml時，對HSC-T6生長增殖有抑制作用，其強度隨濃度的增加而增強（P<0.01）；丹參素、黃芪對

3、TGF-β1刺激HSC-T6引起的增殖有明顯的抑制作用，呈劑量依賴性（P<0.01）；丹參素、黃芪最佳濃度為0.0125mg/ml～0.05mg/ml。（2）丹參素、黃芪能減少TGF-β1誘導(dǎo)的α-SMA表達，下調(diào)Ⅰ、Ⅲ型膠原合成和分泌（P<0.01）。（3）丹參素、黃芪能下調(diào)HSC-T6細胞膜上TβRⅠ、Ⅱ的表達，隨濃度的增高增強（P<0.01），丹參素對TβRⅠ的抑制作用強于黃芪（P<0.01）。（4）TGF-β1可促進HSC-T6

4、內(nèi)Smad2、3、7mRNA的表達；丹參素、黃芪下調(diào)HSC-T6內(nèi)Smad2、3mRNA的表達（P<0.01），并上調(diào)Smad7 mRNA的表達（P<0.01）。
　　 結(jié)論：體外細胞試驗研究表明，丹參素、黃芪能下調(diào)HSC-T6細胞膜上TβRⅠ、Ⅱ的表達；下調(diào)Smad2、3mRNA的表達，上調(diào)Smad7mRNA表達；抑制HSC-T6活化增殖及TGF-β1促進HSC-T6活化的作用，抑制α-SMA表達；減少Ⅰ、Ⅲ型膠原合成和分泌。