COX-2對HSC-T6細胞中Acsl家族相關基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　研究COX-2對HSC-T6細胞中Acsl家族相關基因表達的影響，明確COX-2調節(jié)HSC-T6細胞脂類代謝的作用環(huán)節(jié)。
　　方法：
　　1、實驗分組：HSC-T6細胞組（空白組），pYr-1.1-COX-2 shRNA組（COX-2 shRNA組）；pYr-1.1-NC組（空載體組）。
　　2、將構建好的pYr-1.1-COX-2 shRNA及pYr-1.1-NC分別轉染至HSC-T6細胞中，并于轉

2、染后48小時用熒光倒置顯微鏡觀察轉染效率。
　　3、利用Real-time PCR技術檢測轉染后各組細胞內(nèi)COX-2、Acsl1、Acsl3、Acsl4、Acsl5、Acsl6基因表達情況。
　　4、根據(jù)Real-time PCR技術檢測結果，選取Acsl家族中有意義的基因，再利用Western Blot技術檢測HSC-T6細胞中Acsl家族相關基因的蛋白表達。
　　結果：
　　1、轉染HSC-T6細胞48小時后

3、，在熒光倒置顯微鏡下可見細胞質中分布著綠色熒光，且轉染效率達75％以上。
　　2、HSC-T6細胞不同組別中COX-2 mRNA表達情況：COX-2 mRNA在COX-2 shRNA組中表達低于空白組和空載體組，統(tǒng)計學處理有顯著意義(p＜0.05)。
　　3、HSC-T6細胞不同組別中Acsl家族相關基因 mRNA表達情況：COX-2 shRNA組中Acsl6 mRNA表達較空白組及空載體組明顯增加，統(tǒng)計學處理有顯著意義(p

4、＜0.05)，但Acsl1、Acsl3、Acsl4、Acsl5mRNA表達變化不大，沒有統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。
　　4、HSC-T6細胞不同組別中Acsl6蛋白質表達情況：COX-2 shRNA組中Acsl6蛋白質表達較空白組及空載體組明顯增加，統(tǒng)計學處理有顯著意義(p＜0.05)。
　　結論：
　　1、靶向COX-2的shRNA可以明顯沉默HSC-T6細胞中COX-2的表達。
　　2、在大鼠HSC-T6細