托吡酯引起泌汗障礙的流行病學(xué)分析及其發(fā)生機(jī)制的研究.pdf

1、托吡酯(topiramate，TPM)主要用于癲癎及其他神經(jīng)精神疾病的治療，通常耐受良好。少汗或無(wú)汗是該藥物引起的不良反應(yīng)之一，在兒童患者中發(fā)生率較高，一定程度上限制了這一藥物的臨床應(yīng)用。托吡酯減少汗液分泌的確切機(jī)制尚不明確，對(duì)這一問(wèn)題的探討可為有效地預(yù)防、對(duì)抗此種副作用的發(fā)生提供依據(jù)，從而提高癲癎患者藥物治療的依從性和治療效果；另一方面，多汗癥的治療手段較少，效果亦欠佳，對(duì)托吡酯引起泌汗障礙的機(jī)制進(jìn)行研究可以化害為利，為托吡酯治療多汗

2、癥提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。 本課題首先應(yīng)用流行病學(xué)研究方法，回顧分析參加2002年全國(guó)托吡酯上市后療效和安全性監(jiān)測(cè)多中心觀察的10，612例癲癎患者的資料，探討托吡酯引起的泌汗障礙的發(fā)生率、臨床轉(zhuǎn)歸及危險(xiǎn)因素，以期加深對(duì)這種不良反應(yīng)發(fā)生規(guī)律的認(rèn)識(shí)，并為其發(fā)生機(jī)制的研究提供線索。繼而，建立托吡酯引起泌汗障礙的小鼠動(dòng)物模型，以明確托吡酯是否能夠抑制小鼠汗腺的分泌及其發(fā)生規(guī)律和影響因素。在成功建立可靠動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，探討⑴泌汗效應(yīng)器(汗腺)是

3、否存在托吡酯已知藥理作用的靶點(diǎn)；⑵托吡酯引起的泌汗障礙是否與碳酸酐酶(carbonic anhydrase，CA)抑制作用有關(guān)；⑶托吡酯是否影響汗腺形態(tài)或汗腺分泌過(guò)程中起重要作用的關(guān)鍵蛋白的表達(dá)與功能，以期闡明托吡酯引起泌汗障礙的確切機(jī)制。 主要研究結(jié)果如下： 接受托吡酯治療的患者中396例（3.73％）發(fā)生泌汗障礙，主要為12歲以下兒童，泌汗障礙的發(fā)生率在成年以前隨年齡增大而逐漸降低；兒童、青少年及成年患者泌汗障礙的發(fā)

4、生率分別為5.85％，0.96％和0.30％。泌汗障礙在加量期多見，多可耐受，極少數(shù)病例需停藥。多數(shù)患者的癥狀在數(shù)月內(nèi)或隨天氣轉(zhuǎn)涼而消失，少數(shù)在服藥期間持續(xù)存在。性別、發(fā)作頻率、發(fā)作類型、是否加用其他抗癲癎藥物及療效并不影響泌汗障礙的發(fā)生，而年齡較低、劑量較高者在夏季較易出現(xiàn)此種不良反應(yīng)。在控制年齡因素的影響后，托吡酯劑量對(duì)泌汗障礙的發(fā)生無(wú)顯著影響；而在控制劑量因素的影響后，年齡仍顯著影響泌汗障礙的發(fā)生。 2周齡和2月齡小鼠隨機(jī)

5、分配至托吡酯低劑量組(20 mg/kg/d)、高劑量組(80 mg/kg/d)和對(duì)照組，每組12只。經(jīng)口給予小鼠托吡酯，并動(dòng)態(tài)觀察其泌汗功能及體溫變化，觀察時(shí)程為4周。應(yīng)用硅膠印模技術(shù)發(fā)現(xiàn)：給予托吡酯后第2周，幼年和成年小鼠高、低劑量組的單個(gè)汗腺平均分泌量均較對(duì)照組或處理前明顯降低；給予托吡酯后第4周，幼年和成年小鼠高、低劑量組的活動(dòng)汗腺數(shù)目均較對(duì)照組或處理前明顯降低。托吡酯處理后1～4周，各劑量組小鼠各周的平均體溫?zé)o明顯差異，各周不同

6、劑量組的平均體溫也沒有顯著性差異。 免疫組織熒光染色未發(fā)現(xiàn)在正常小鼠皮膚組織及汗腺的分泌細(xì)胞存在γ-氨基丁酸A型（gamma-aminobutyric acid，GABAA）受體α1 亞單位、谷氨酸受體亞型α - 氨基羥甲基惡唑丙酸（α -amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid ， AMPA ）GluR1/2/3/4 亞單位和海人酸（kainic acid，KA

7、）受體GluR5/6/7 亞單位的表達(dá)。少汗小鼠的汗腺形態(tài)、碳酸酐酶活性及Na，K-ATP 酶活性與對(duì)照組無(wú)明顯差別。應(yīng)用免疫熒光和western blot 技術(shù)發(fā)現(xiàn)：小鼠在托吡酯處理后泌汗減少，碳酸酐酶同功酶II 型(carbonic anhydraseII，CAII)蛋白表達(dá)未出現(xiàn)顯著變化，但汗腺組織胞膜的水通道蛋白-5(aquaporin-5，AQP5)表達(dá)量下調(diào)。 本課題組首次對(duì)托吡酯引起泌汗障礙的發(fā)生率及影響因素進(jìn)行大

8、規(guī)模、大范圍的系統(tǒng)流行病學(xué)調(diào)查分析，并首先建立了實(shí)用可靠的動(dòng)物模型，對(duì)這種不良反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。綜合全部實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本研究提示： 夏季和低齡是托吡酯引起泌汗障礙的主要危險(xiǎn)因素，而托吡酯劑量對(duì)泌汗功能的影響較??；托吡酯可以抑制小鼠汗液的分泌，小鼠的年齡并不影響這種抑制作用，但托吡酯對(duì)小鼠體溫?zé)o明顯影響；托吡酯并不是通過(guò)對(duì)GABAA受體及AMPA和KA兩種谷氨酸受體亞型的作用而在汗腺分泌細(xì)胞抑制泌汗；托吡酯不影響汗腺形態(tài)