脂肪酸結(jié)合蛋白4對(duì)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的影響.pdf

1、背景：
　　胚胎著床是指胚泡進(jìn)入子宮腔后與子宮內(nèi)膜粘附，并逐漸埋入子宮內(nèi)膜的過程，它是生殖的關(guān)鍵性調(diào)控環(huán)節(jié)，著床失敗是早期妊娠丟失的主要原因。胚胎著床受到激素，細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、粘附因子及其配基等組成的分子網(wǎng)絡(luò)的精細(xì)調(diào)控，但其機(jī)制遠(yuǎn)未闡明。我們前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞表達(dá)脂肪酸結(jié)合蛋白4（FABP4，常被稱為aP2），利用臨床標(biāo)本，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)分泌期子宮內(nèi)膜組織表達(dá)FABP4較增生期上調(diào)，蛻膜組織的FABP4表達(dá)較非妊娠期子宮內(nèi)

2、膜進(jìn)一步增加;雌、孕激素分別及聯(lián)合刺激作用子宮內(nèi)膜細(xì)胞，結(jié)果顯示雌、孕激素分別作用和雌孕激素聯(lián)合作用，對(duì)FABP4的表達(dá)均有上調(diào)作用。
　　目的：
　　明確FABP4是否參與調(diào)控子宮內(nèi)膜細(xì)胞的生物學(xué)功能，觀察FABP4對(duì)子官內(nèi)膜容受性標(biāo)志性因子調(diào)控作用，應(yīng)用體外粘附模型驗(yàn)證FABP4是否參與對(duì)胚胎粘附和著床的調(diào)控;研究和探索FABP4是否參與胚胎著床的過程及其可能的機(jī)制。
　　方法：
　　1、Western bl

3、ot和細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)子宮內(nèi)膜細(xì)胞lshikawa和RL-952細(xì)胞FABP4的表達(dá);2、采用siRNA干擾FABP4基因的表達(dá)和FABP4特異性抑制劑阻斷FABP4功能，利用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力，劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移、Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲力;3、采用FABP4特異性抑制劑阻斷Ishikawa和RL-952細(xì)胞FABP4功能，利用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)子宮內(nèi)膜容受因子白血病抑制因子(leukemia inhibitory

4、factor, LIF)、整合蛋白beta3(Integrin beta3，Integrin-β3)、緊密連接蛋白4(claudin4)的蛋白水平。
　　結(jié)果：
　　(1) Western blot和細(xì)胞免疫熒光顯示Ishikawa和RL-952細(xì)胞表達(dá)FABP4;
　　(2).靶向性siRNA干擾Ishikawa和RL-952細(xì)胞FABP4的表達(dá)和特異性FABP4抑制劑阻斷FABP4功能顯著抑制子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖、遷移