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文檔簡介
1、目的:
探討水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)基因?qū)Ξ愇蛔訉m內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞(Endometrial glandular epithelial cells,EM)增殖及遷移的影響。
方法:
構(gòu)建可靶向沉默AQP5基因的質(zhì)粒,在293T細(xì)胞中包裝形成病毒顆粒后,感染原代培養(yǎng)的異位子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞。熒光定量RT-PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測異位子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞中AQP5 mRNA和蛋白表達(dá),MTT法測
2、定細(xì)胞增殖;Transwell技術(shù)檢測細(xì)胞的體外遷移能力;蛋白質(zhì)印跡法檢測AKT活化情況。并構(gòu)建裸鼠腹腔內(nèi)子宮內(nèi)膜異位癥模型,考察陰性對照組和AQP沉默組子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞在裸鼠腹腔內(nèi)瘤體生長情況及腹膜轉(zhuǎn)移情況。
結(jié)果:
與陰性對照組比,AQP5沉默組細(xì)胞的增殖和遷移能力降低(均P<0.05);p-AKT/AKT降低(P<0.05)。體內(nèi)實驗顯示,AQP5沉默組裸鼠的瘤體生長及腹膜轉(zhuǎn)移能力較陰性對照組明顯減弱(P<0
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