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文檔簡介
1、目的:前言嚴(yán)重的內(nèi)毒素血癥,可導(dǎo)致感染性休克及多臟器功能衰竭,其中腎臟是最容易受累的臟器之一.內(nèi)毒素血癥所致臟器損傷的機(jī)制很復(fù)雜,目前對于細(xì)胞因子或者炎癥介質(zhì)在其中所起的作用越來越關(guān)注.已知有多種細(xì)胞因子參與了內(nèi)毒素血癥時的炎癥反應(yīng),核轉(zhuǎn)錄因子(Nuclear Transcription Factor of Kappa B,NF-κB)作為細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)者,在內(nèi)毒素休克中起重要作用.機(jī)體在受到炎癥損傷時必然有抗炎系統(tǒng)的激活,參與組織
2、修復(fù),轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)作為抗炎因子近來也得到很大關(guān)注.該實(shí)驗(yàn)從這兩個促炎和抗炎因子入手,研究內(nèi)毒素血癥時腎損害的發(fā)生機(jī)制,為臨床診治提供新的理論參考.材料與方法1、動物模型制備:將80只健康7日齡Wistar大鼠隨機(jī)分為2組,對照組和內(nèi)毒素組,每組4個時間點(diǎn),每組各時間點(diǎn)為10只7日齡Wistar大鼠,對照組:腹腔內(nèi)注射0.9%氯化鈉溶液0.1ml;內(nèi)毒素組(L
3、PS):腹腔注射等容積LPS(E.coli0.55;B5,Sigma公司)5mg/kg.注射后存活者于實(shí)驗(yàn)后1 h、4 h、8 h、12 h各時間點(diǎn)將大鼠斷頭處理留取腎標(biāo)本,用4%多聚甲醛/PBS固定,每組動物各取3塊1 mm3大小腎臟組織經(jīng)戊二醛及鋨酸固定待用.2、采用免疫組化方法檢測腎組織NF-κB及TGF-β1.3、采用透射電鏡方法觀察腎臟超微結(jié)構(gòu)的改變.4、統(tǒng)計學(xué)分析,數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),p<0
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