包裹長(zhǎng)春新堿抗CD20脂質(zhì)體靶向殺傷黑色素瘤干細(xì)胞研究.pdf

1、黑色素瘤是一種主要發(fā)病于皮膚上的惡性黑色素細(xì)胞腫瘤。它是一種罕見(jiàn)的皮膚癌,其惡性程度較高,在皮膚癌中致死率非常高。目前唯一有效的治療方式是在腫瘤厚度未達(dá)到1毫米時(shí)手術(shù)切除腫瘤。在腫瘤較淺時(shí)的病損5年治愈率可達(dá)到100％。所以治愈率取決于早期診斷和早期治療。黑素瘤的預(yù)后較差,中晚期患者五年生存率只有10％左右,所以當(dāng)黑色素腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散后致死率極高。
　　黑色素瘤細(xì)胞的前體細(xì)胞來(lái)自于突變的黑色素瘤干細(xì)胞(MMSC),所以首先把黑色素瘤

2、干細(xì)胞通過(guò)藥物清除掉,對(duì)于黑色素瘤的發(fā)生發(fā)展起到了完全扼制作用。目前對(duì)黑色素瘤的治療手段不敏感,所需要的藥物劑量特別大。研究發(fā)現(xiàn)黑色素瘤干性細(xì)胞表達(dá) CD20抗原,那么此表型分子可作為納米藥物的理想靶點(diǎn);并且在使用納米脂質(zhì)體包裹藥物遞送到目的細(xì)胞,可降低用藥量,和藥物副作用。
　　納米脂質(zhì)體已被廣泛應(yīng)用到改善傳統(tǒng)的癌癥治療策略。以納米脂質(zhì)體為載體的基礎(chǔ)化療藥物,可以降低化療藥物的副作用,并且有效地防止藥物快速降解,很好的改變了藥代

3、動(dòng)力學(xué),并可以在腫瘤部位富集;增加了在腫瘤部位的藥物濃度。在過(guò)去的二十年中,大量的化療藥物被包裹在納米載體中,這些藥物已進(jìn)入臨床開(kāi)發(fā)或已被批準(zhǔn)臨床應(yīng)用。在批準(zhǔn)的臨床藥物產(chǎn)品中以生物可降解的聚合物納米粒子和脂質(zhì)體占據(jù)多數(shù)。脂質(zhì)體是一種單層或雙層磷脂雙分子膜形成的球型納米載體,因?yàn)榈投拘浴⑸锵嗳菪院?、可降低用藥劑量、并有效避免耐藥性等特?目前已被廣泛應(yīng)用。最近,一些脂質(zhì)體藥物制劑已被批準(zhǔn)在臨床使用,其中Doxil是第一個(gè)被批準(zhǔn)的脂質(zhì)體形

4、式的化療藥物,于1995年上市。脂質(zhì)體缺陷之一是無(wú)法控制藥物釋放。脂質(zhì)體雖然可以聚集在生物體內(nèi)的腫瘤,但其靶向性較低;而脂質(zhì)體偶聯(lián)抗體(免疫脂質(zhì)體)既具有靶向性又可以高效地將藥物遞送到腫瘤部位。免疫脂質(zhì)體作為靶向制劑的一種,具有低毒性、生物相容性好、可降低用藥劑量、并有效避免耐藥性、長(zhǎng)效、被包封藥物得到有效地保護(hù)、靶向性更為精確、有效地控制藥物釋放和提高病人用藥順應(yīng)性等優(yōu)點(diǎn)。
　　本課題中的黑色素瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物多柔比星有很高的抗

5、藥性,于是我們選擇了使用鞘磷脂作為脂質(zhì)體的脂材,包裹長(zhǎng)春新堿,并連接上CD20抗體;組裝成一免疫脂質(zhì)體使其具有靶向性、較好的生物相容性以及較低的用藥量。我們通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)制備的脂質(zhì)體可以很好地靶向黑色素瘤干細(xì)胞。使用馬爾文粒徑儀檢測(cè)制備的脂質(zhì)體粒徑均一,符合用藥要求。利用分光光度計(jì)測(cè)定了脂質(zhì)體的藥物包封率和體外釋放藥物動(dòng)力學(xué)。在體外體內(nèi)驗(yàn)證脂質(zhì)體可以有效的靶向殺傷黑色素瘤干細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞。這種連接有CD20抗體主動(dòng)靶向功能的免疫