重組人骨形成蛋白成骨分化及其定量測活的研究.pdf

1、我研究組率先在大腸桿菌中高表達(dá)獲得具誘骨活性的人BMP-2和-3羧基端肽,為BMP的研究和應(yīng)用提供了新來源.然而BMP的研究和應(yīng)用遇到了一大難題--至今還沒有理想的定量測定BMP生物學(xué)活性的方法,這大大限制了BMP臨床應(yīng)用的進(jìn)度.近年來又發(fā)展了一些體外測活方法,如測定BMP刺激后培養(yǎng)細(xì)胞的ALP活性、蛋白聚糖水平、鈣鹽沉積的量和速度等.但進(jìn)展都不大,BMP的定量測活仍未解決.為此我們也從BMP分化功能的角度探討了BMP的定量測活,包括測

2、定BMP刺激后ALP活性、合成蛋白量等的變化,除骨髓細(xì)胞外,其余細(xì)胞系A(chǔ)LP活性并無明顯變化.另外我們還用放免法測定了BMP-2作用不同細(xì)胞后骨鈣素（OC）的含量變化.近年克隆發(fā)現(xiàn)的Cbfal是成骨分化特異性轉(zhuǎn)錄因子,對成骨分化發(fā)揮極其關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄激活作用,Cbfal的基因敲除或突變將導(dǎo)致全身骨骼發(fā)育障礙.Cbfal在非成骨前體細(xì)胞均可上調(diào)成骨分化相關(guān)基因--骨鈣素、堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP)、骨橋素及