FG020326藥代動力學特性及其對CYP3A4活性影響的研究.pdf

1、腫瘤細胞產(chǎn)生的多藥耐藥(Multidrugresistance，MDR)是指腫瘤細胞對一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生抗藥性的同時，對結構和作用機制不同的抗腫瘤藥物產(chǎn)生交叉耐藥性。MDR已經(jīng)成為目前影響腫瘤化療療效的主要障礙。MDR形成機制復雜，而且是多因素的。P-糖蛋白(P-gp)、多藥耐藥相關蛋白(MRP)、肺耐藥相關蛋白(LRP)、乳腺癌抗藥性蛋白(BCRP)、谷胱甘肽S轉移酶(GST)及谷胱甘肽(GSH)的升高；拓撲異構酶Ⅱ(TopoⅡ)活力

2、降低，凋亡抑制蛋白(IAPs)及蛋白激酶C(PKC)、磷酸化水平變化等可能單獨或聯(lián)合在MDR形成中起作用。但在MDR中起主要作用且研究得最為深入的是mdr1/P-gp的過表達。P-gp是由mdr1基因編碼的分子量為170KD的磷酸糖蛋白，該蛋白屬于ABC跨膜轉運蛋白超家族中的一員，可能量依賴性地將藥物泵出細胞外，從而產(chǎn)生耐藥。因此，克服MDR，恢復化療藥物的敏感性是提高化療療效的一個重要方法，是化療領域亟需解決的難題。 克服MD

3、R主要有兩種方法：其一，開發(fā)對MDR細胞不具有抗藥性的新型抗腫瘤藥物；其二，尋找低毒、高效、對抗癌藥物藥代動力學無影響的MDR逆轉劑，恢復MDR細胞對抗癌藥物的敏感性，從而提高化療療效。 開發(fā)能夠抑制P-gp藥物外排泵功能的逆轉劑作為克服MDR的一種主要方法已經(jīng)研究了20多年。根據(jù)它們的特性，通常將它們分為3代。第一代逆轉劑主要包括維拉帕米和環(huán)孢素A，在體外實驗中具有強的逆轉活性，但由于自身劑量限制性毒性使其在體內無法達到體外有

4、效逆轉MDR所需濃度；第二代逆轉劑主要包括dexverapamil、valspodar(PSC833)和biricodar(VX-710)等，盡管在體內能夠達到體外有效逆轉MDR所需血藥濃度，但干擾合用的抗癌藥物藥代動力學特性，臨床試驗結果總是令人失望。主要是由于這些逆轉劑在抑制P-gp的同時，也抑制了體內重要的生物轉化酶CYP3A4。根據(jù)定量結構-活性關系(quantitativestructure-activityrelations

5、hips，QSARs)和組合化學方法所開發(fā)的具有高特異性逆轉作用的第三代逆轉劑(如LY335979，ONT-093，R101933，GF120918，XR9576)在與抗癌藥物合用時很少干擾它們的藥代動力學。盡管到目前為止真正能夠用于臨床的逆轉劑尚未開發(fā)成功，但是第三代逆轉劑已經(jīng)讓人們看到了最終克服MDR的曙光。 FG020326是一類多芳基取代咪唑類化合物。符立梧、陳黎明等的研究表明FG020326不僅在體外具有強的逆轉MDR

6、活性，而且在以KBv200細胞所建立的移植瘤模型進行的體內逆轉實驗亦顯示FG020326具有良好的體內逆轉活性。本研究的主要目的就是要明確FG020326是否會影響肝藥酶CYP3A4活性；明確FG020326在體內的藥代動力學特性，確定在不同的給藥方式下其能否達到體外有效逆轉MDR所需濃度. 一、FG020326對CYP3A4酶活性影響的研究 以CYP3A4特異底物nifedipine為探針，以HPLC法檢測其代謝產(chǎn)物o

7、xidisednifedipine的量，建立體外評價CYP3A4酶活性的方法，明確FG020326是否影響其活性。 研究結果顯示：FG020326在12.5μmo1·L-1時對CYP3A4活性無明顯影響；但隨著濃度的升高，對CYP3A4的活性會產(chǎn)生影響，但是該濃度已遠高于逆轉MDR所需要的有效濃度。 二、FG020326在KM小鼠體內藥代動力學研究 選用KM小鼠作為藥代動力學研究模型；應用外標法建立了測定FG02

8、0326血藥濃度的反相高效液相色譜法(reversephasehigh-performanceliquidchromatography,RP-HPLC)。本研究測定了不同給藥方式下FG020326在小鼠體內的藥代動力學特性。 單次尾靜脈注射，給藥量為30mg·kg-1，分時取血、處理進樣分析。尾靜脈單次給藥后，F(xiàn)G020326在體內過程符合二室模型，主要藥代動力學參數(shù)如下：A/ng·ml-1：21130；B/ng·ml-1：14

9、97；T1/2α：0.088h；T1/2β：5.33h；K10/h-1：1.60；K21/h-1：0.64；K12/h-1：5.81；CL/ml·h-1：48；AUC0～∝：14183h·ng·ml-1；Vd：0.37L。 單次灌胃(200mg·kg-1)后，分時取血、處理進樣分析。FG020326在體內過程符合二室模型，主要藥代動力學參數(shù)如下：T1/2β：6.31h，AUC0～∝：43088h·ng·ml-1；Vd：0.93L

10、；Tmax：2.575h；Cmax：4045.6ng·ml-1。 研究結果顯示：無論是靜脈注射還是灌胃給藥，在無明顯毒副作用的劑量下，均取得了長時間的逆轉MDR所需要的血藥濃度。 單次尾靜脈給藥16h后，其血藥濃度仍達到0.4μmolL-1，該濃度仍然能夠有效逆轉MDR。在24h時的血藥濃度仍可有效逆轉MDR。 單次灌胃后16hFG020326的血藥濃度為0.57μmol·L-1，同樣該濃度仍可有效恢復MDR細胞