潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜PI3K的表達及其抑制劑對TNF-α表達的影響.pdf

1、背景與目的 潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis，UC)是一種慢性非特異性的結(jié)腸炎癥，與克羅恩病(Crohn’s disease，CD)一起被稱為炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Disease，IBD)。該病主要累及粘膜及粘膜下層，其病因和發(fā)病機理至今仍不清楚，治療上缺乏特異有效的藥物。目前的研究認為UC的發(fā)病與環(huán)境、遺傳、免疫等多個因素有關(guān)，其中尤與免疫反應異常關(guān)系密切<'[1]>。各種生化介質(zhì)

2、包括細胞因子、生長因子等在這一異常的免疫反應中起著重要的作用。其中細胞因子，由于其在免疫和炎癥反應中的獨特作用而倍受重視。大量的研究已證實各種細胞因子，如腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF—α)、白細胞介素-1(Interleukin-1，IL-1)等的相互作用，導致了炎癥的發(fā)生與持續(xù)發(fā)展，在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生發(fā)展中起著十分重要的作用。晚近的研究已證實細胞因子的調(diào)控和釋放與P13K／Akt信號傳導通路密切相

3、關(guān)。因此，從P13K／Akt信號通路的角度研究潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機理進而尋找治療新策略和新藥物具有重要的理論意義和臨床應用價值。 本研究采用體外組織培養(yǎng)、免疫組化和ELISA技術(shù)研究：(1)潰瘍性結(jié)腸炎患者腸粘膜組織中P13K的表達；(2)體外組織培養(yǎng)條件下，P13K抑制劑Wortmannin對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸粘膜組織’TNF-α表達的影響。 旨在探討P13K／AM信號傳導通路在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病中的作用，并為Wortm

4、annin作為潰瘍性結(jié)腸炎治療新藥物提供實驗依據(jù)。 材料和方法 收集四川大學華西醫(yī)院消化內(nèi)鏡中心確診的潰瘍性結(jié)腸炎患者30例，15例結(jié)腸癌旁正常組織作為對照，采用①免疫組化法檢測潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜組織中p-Akt的表達情況；②體外組織培養(yǎng)條件下觀察P13K／Akt信號傳導通路抑制劑Wortmannin對潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜活檢組織TNF-α表達的影響。分為正常對照組、潰瘍性結(jié)腸炎+W10rtmannin組和潰瘍性結(jié)腸炎+生

5、理鹽水組，用ELISA法檢測各組組織培養(yǎng)液中TNF-α含量。免疫組化檢測Wortmannin對p-Akt表達的影響。 結(jié)果 ①潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜組織中p-Akt的表達明顯高于正常對照組(P<0.05)。 ②與未用Wortmannin處理的潰瘍性結(jié)腸炎組比較，Wortmannin處理后潰瘍性結(jié)腸炎腸粘膜組織分泌TNF-α的水平明顯降低(P