艾迪莎對大鼠潰瘍性結腸炎MMP-2和TNF-α表達的影響.pdf

1、背景和目的：潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種非特性炎癥性疾病，主要臨床表現為腹痛、腹瀉和粘液膿血便。UC的病變部位主要好發(fā)于直腸和結腸，其病因和發(fā)病機理目前尚不明確。潰瘍性結腸炎主要侵及腸道的黏膜層和黏膜下層，以腸道細胞外基質(extracellular matrix，ECM)的降解和黏膜潰瘍的形成為主要病理特點。目前認為基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)在黏膜

2、的降解過程中起重要作用，并且認為多種細胞因子也參與UC的發(fā)生和發(fā)展。當前，氨基水楊酸類藥物如艾迪莎和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazin，SASP)是治療潰瘍性結腸炎的主要和基本藥物。在本研究中，用艾迪莎和SASP治療TNBS誘導的大鼠潰瘍性結腸炎，以觀測它們對大鼠的一般狀態(tài)、疾病活動指數（disease activityindex，DAI）評分及MMP-2和TNF-α表達的影響，并揭示它們治療潰瘍性結腸炎的機制，從而為今后更有效的治

3、療UC提供基礎理論依據。
　　 材料和方法：1、建立動物模型：將禁食不禁水48小時的SD大鼠用水合氯醛腹腔注射麻醉后，予以100mg/kgTNBS和50％乙醇0.25ml混合液從肛門一次性注入。
　　 2、動物分組：取144只六周齡雄性SD大鼠，體重180-220g，隨機分為4組，分別為：
　　 正常組(N)：鹽水灌腸，并予鹽水灌胃；
　　 艾迪莎組(A)：TNBS/乙醇混合液灌腸，并予艾迪莎80mg/k

4、g日兩次灌胃；
　　 SASP組(S)：TNBS/乙醇混合液灌腸，并予SASP120mg/kg日兩次灌胃；
　　 模型組(C)：TNBS/乙醇混合液灌腸，并予鹽水灌胃。
　　 3、觀察大鼠的一般狀態(tài)、疾病活動指數(DAI)評分，并分別于灌腸后第3、7、14、21、35、56天處死動物，每組6只，取病變結腸為組織標本，部分組織置于液氮中凍存，用于進行逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)，部分組織用10%的甲醛固定

5、，HE染色用于光鏡下觀察組織病理學改變，和免疫組織化學分析。
　　 4、免疫組化方法測定大鼠結腸黏膜MMP-2和TNF-α的蛋白表達。
　　 5、RT-PCR方法測定大鼠結腸黏膜MMP-2和TNF-α的mRNA表達。
　　 結果：1、大鼠的一般狀態(tài)和DAI評分及光鏡下組織病理學觀察均有明顯改變提示大鼠潰瘍性結腸炎模型成功。艾迪莎組和SASP組的大鼠的一般狀態(tài)、DAI評分和病理組織改變都有顯著的改善
　　

6、2、免疫組化檢測到模型組大鼠組織的MMP-2和TNF-α的表達明顯高于正常組、艾迪莎組和SASP組，兩組之間比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 3、RT-PCT檢測到模型組大鼠組織的MMP-2和TNF-α在模型組中的表達明顯高于正常組、艾迪莎組和SASP組，兩組之間比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 4、SASP組和艾迪莎組在RT-PCR檢測和免疫組化檢測中對比無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 結