潰瘍性結(jié)腸炎菌群變化對腸上皮細(xì)胞TLRs表達(dá)影響.pdf

1、目的：通過分離培養(yǎng)腸黏膜上皮細(xì)胞，給予不同構(gòu)成比例的腸道內(nèi)容物及特異性TLR抗體，檢測對比腸黏膜上皮細(xì)胞TLR4、NF-κB的表達(dá)和細(xì)胞因子的變化，直觀驗(yàn)證不同腸道內(nèi)容物及TLR抗體對TLR介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的影響。
　　方法：選用體質(zhì)量在300g左右的健康大鼠20只，隨機(jī)分為正常組(n=10)和UC組(n=10)，于造模后第4天處死，取結(jié)腸段進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，用不同構(gòu)成比例的細(xì)菌或干預(yù)措施處理腸黏膜上皮細(xì)胞后，分別進(jìn)行不同干預(yù)并分成相應(yīng)

2、分組：A組：對照組(無干預(yù))；B組：正常腸道腔內(nèi)菌群組(加入正常腸腸腔黏膜沖洗液)；C組：正常腸道膜菌群組(加入正常腸腸黏膜混懸液)；D組：UC模型腸腔內(nèi)菌群組(加入U(xiǎn)C動物模型腸腔黏膜沖洗液)；E組：UC模型腸粘膜菌群組(加入U(xiǎn)C動物模型腸黏膜混懸液)；F組：抗TLR抗體組(加入抗TLR抗體)。再收集細(xì)胞檢測TLR4、NF-κB的表達(dá)，收集上清液檢測細(xì)胞因子IFN-γ、IL-1β水平。
　　結(jié)果：D、E組與A組相比較，TLR4、

3、NF-κBmRNA及蛋白水平和IFN-γ、IL-1β炎癥因子水平明顯升高，D、E組分別與B、C組相比TLR4、NF-κBmRNA及蛋白水平和IFN-γ、IL-1β炎癥因子水平明顯升高，A組與B、C組相比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，F(xiàn)組與D組比較TLR4mRNA、NF-κB蛋白水平明顯下降，NF-κBmRNA、TLR4蛋白水平、IFN-γ、IL-1β炎癥因子水平無明顯改變，F(xiàn)組與E組比較TLR4mRNA、TLR4和NF-κB蛋白水平、IFN-γ炎癥因