丙戊酸鈉對女性甾體生成系統(tǒng)影響的初步研究.pdf

1、目的：通過豬的卵泡內(nèi)膜細(xì)胞、正常女性及PCOS患者卵巢顆粒細(xì)胞原代培養(yǎng)體系，研究丙戊酸鈉(VPA)對卵泡內(nèi)膜細(xì)胞睪酮生成和對細(xì)胞色素P45017α羥化酶(CYP17)、膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)和類固醇激素急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)mRNA的影響；以及研究VPA對顆粒細(xì)胞激素生成及膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)、芳香化酶(P450arom)和類固醇激素急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)mRNA的影響。探討VPA誘導(dǎo)女性多囊卵巢綜合征的發(fā)

2、病機(jī)制，論證化合物對女性排卵障礙產(chǎn)生影響的可能機(jī)理。 方法：分別采用豬的卵泡內(nèi)膜細(xì)胞、正常女性和PCOS患者卵巢顆粒細(xì)胞進(jìn)行體外原代培養(yǎng)，并給予不同濃度的VPA(0mg/L、100mg/L和250mg/L)處理，48h后收集培養(yǎng)液，采用ELISA法檢測豬卵泡內(nèi)膜細(xì)胞的睪酮的水平，采用熒光實時RT-PCR(TaqMan.assay)方法檢測豬卵泡內(nèi)膜細(xì)胞中CYP17、P450scc和StARmRNA表達(dá)。采用放射免疫方法測定正常婦

3、女和多囊卵巢綜合癥患者卵巢顆粒細(xì)胞生成孕酮及雌二醇的水平，采用實時定量PCR方法測定以上顆粒細(xì)胞中P450scc、P450arom和StARmRNA的表達(dá)。 結(jié)果：VPA刺激了豬卵泡內(nèi)膜細(xì)胞睪酮分泌水平的升高(P＜0.05)，且CYP17(P＜0.01)、P450scc(P＜0.01)和StAR(P＜0.01)mRNA表達(dá)增加。VPA刺激了正常女性顆粒細(xì)胞孕酮的分泌(P＜0.05)及芳香化酶mRNA表達(dá)的增加(P＜0.05)，但

4、雌二醇分泌下降(P＜0.05)。VPA刺激PCOS女性顆粒細(xì)胞孕酮(P＜0.05)雌二醇(P＜0.05)的分泌和P450sccmRNA表達(dá)的增加(P＜0.05)。StARmRNA的表達(dá)在兩種顆粒細(xì)胞均沒有顯著性差異。 結(jié)論： VPA可直接作用于卵泡內(nèi)膜細(xì)胞，改變CYP17、P450scc和StARmRNA表達(dá)，引起雄激素的分泌增高。VPA可以引起PCOS患者顆粒細(xì)胞P450scc表達(dá)的增加，這與該綜合征特征性的睪酮和雌二