甲狀腺素對(duì)成年期甲狀腺功能減退癥大鼠背側(cè)海馬SNAP-25表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　 以成年雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射丙基硫氧嘧啶（6-n-propyl-2-thiouracil，PTU）1 mg/100g 體重建立成年期甲狀腺功能減退癥（簡稱甲減）動(dòng)物模型，研究成年期甲減大鼠海馬突觸小體相關(guān)蛋白-25(synaptosomal-associated protein of 25kDa，SNAP-25)的表達(dá)情況及甲狀腺素替代治療后的恢復(fù)狀況，探討甲減腦損傷及恢復(fù)的分子機(jī)制。

2、　　 方法:
　　 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠45只，體重250～300 g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，將大鼠隨機(jī)分為4組：(1) 甲減組大鼠每日腹腔注射PTU 1 mg/100g 體重（BW）共六周（n=12）；(2) 小劑量甲狀腺激素替代治療組（T4-5組，n=11）。大鼠每日腹腔注射PTU 1 mg/100g BW，四周后每日給予左旋甲狀腺素(Levothyroxine，L-T4)50 μg/(kg·d)兩周；

3、(3) 大劑量甲狀腺激素替代治療組（T4-20組，n=11）。大鼠每日腹腔注射PTU 1 mg/100g BW，四周后每日給予L-T4 20 mg/100g BW兩周；(4) 正常對(duì)照組大鼠每日腹腔注射同體積生理鹽水六周（n=11）。造模結(jié)束后，采血取腦，應(yīng)用放射免疫法檢測小鼠血清T3、T4水平，超敏S-P法行免疫組織化學(xué)檢測，光學(xué)顯微鏡拍攝海馬CA1、CA3和DG區(qū)照片，應(yīng)用生物圖像分析系統(tǒng)對(duì)CA1區(qū)起始層、放射層、腔隙分子層，CA3

4、區(qū)起始層、透明層、放射層及DG區(qū)分子層、門區(qū)角回的SNAP-25免疫反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行光密度值分析，以平均光密度（average optical density，AOD）值作為觀察指標(biāo)。所有數(shù)據(jù)以±s表示，運(yùn)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（one way ANOVA），進(jìn)一步Post hoc 分析采用LSD法進(jìn)行多重比較。Ps<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.體重變化造模前各組大鼠體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、差異(F(3,42)=0.21，P=0.93)。造模結(jié)束后，正常對(duì)照組大鼠體重增加49.0％，而甲減組、T4-5組、T4-20組分別增加21.5％、32.5％和26.1％（與正常對(duì)照組比較，Ps<0.05)。
　　 2.血清T3、T4水平與正常對(duì)照組相比，甲減組大鼠血清T3、T4水平顯著降低，分別為對(duì)照組的53.6％、77.5％ (Ps<0.02)；小劑量替代治療組大鼠血清T3、T4恢復(fù)至正常對(duì)照組水平；大劑量替代治療組大鼠血清

6、T3、T4顯著高于小劑量替代治療組和正常對(duì)照組(Ps<0.001)。
　　 3.SNAP-25蛋白在各組大鼠海馬CA1、CA3和DG區(qū)各層內(nèi)表達(dá)量的變化免疫組化檢測顯示：SNAP-25的免疫反應(yīng)產(chǎn)物在四組大鼠海馬CA1、CA3和DG區(qū)內(nèi)的分布相似，陽性顆粒（棕黃色）在各區(qū)的每一層均有分布，但密度不同。量化分析結(jié)果顯示：甲減組大鼠海馬CA1、CA3和DG區(qū)各層內(nèi)SNAP-25蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照組顯著增多(Ps<0.039)；予

7、大、小劑量甲狀腺激素替代治療后，SNAP-25的蛋白表達(dá)水平在CA1、CA3和DG區(qū)各層內(nèi)與正常對(duì)照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Ps＞0.458和Ps＞0.078)，但與甲減組比較，小劑量替代治療組大鼠海馬CA3放射層、DG區(qū)分子層和門區(qū)角回以及大劑量替代治療組大鼠海馬CA1、CA3和DG區(qū)各層內(nèi)SNAP-25表達(dá)水平均顯著降低(Ps<0.048)。
　　 結(jié)論：
　　 1.成年期甲減大鼠背側(cè)海馬的SNAP-25蛋白表達(dá)增加。