鹽酸?？颂婺釋δc癌細(xì)胞的放射增敏作用及相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察鹽酸埃克替尼對腸癌細(xì)胞放射敏感性的影響，并從機(jī)制上了解其是否通過改變細(xì)胞DNA雙鏈斷裂修復(fù)、細(xì)胞周期分布及凋亡實(shí)現(xiàn)放射增敏作用。
　　方法：選取野生型腸癌HT29和突變型腸癌HCT116兩種細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)對象，通過MTT方法檢測鹽酸埃克替尼對兩種腸癌細(xì)胞株的增殖抑制率；以吉非替尼為陽性對照，克隆形成實(shí)驗(yàn)分析鹽酸?？颂婺釋煞N腸癌放射增敏作用；運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡和周期，并用免疫熒光方法及western blot方法檢

2、測不同干預(yù)組細(xì)胞中γ-H2AX、53BP1的表達(dá)，最后建立兩種人腸癌細(xì)胞裸鼠荷瘤模型，隨機(jī)分為四組：對照組(con)、鹽酸?？颂婺峤M(IH)、放療組（RT）、聯(lián)合治療組（IH+RT），觀察鹽酸埃克替尼聯(lián)合放療在體內(nèi)水平對腫瘤增殖的影響。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果顯示鹽酸?？颂婺釋T29及HCT116細(xì)胞均有抑制作用，隨藥物濃度的增加其抑制作用而增加；克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示鹽酸?？颂婺釋T29細(xì)胞和HCT116細(xì)胞均有增敏作用，且效果優(yōu)于

3、吉非替尼；流式細(xì)胞儀檢測不同處理組細(xì)胞周期和凋亡結(jié)果顯示，不論對HT29或HCT116細(xì)胞，鹽酸埃克替尼增加了放療后腫瘤細(xì)胞凋亡，且較其他組差異顯著（P＜0.01）；細(xì)胞周期分布分析顯示，在HT29細(xì)胞中聯(lián)合組G2/M期相較于其他三組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），而在HCT116細(xì)胞中聯(lián)合組較其他三組延長G2/M期停滯，但與放療組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；免疫熒光和Western blot檢測結(jié)果顯示，藥物聯(lián)合放療組增加了細(xì)胞

4、γ-H2AX、53BP1的表達(dá)，較其他三組差別明顯（P＜0.05）。體內(nèi)試驗(yàn)顯示，鹽酸?？颂婺崧?lián)合放療組明顯延遲腫瘤生長。
　　結(jié)論：1、鹽酸埃克替尼在體外及體內(nèi)水平均有效增加了人大腸癌細(xì)胞HT29和HCT116的放射敏感性；2、鹽酸?？颂婺嵬ㄟ^影響與DSB修復(fù)相關(guān)重要蛋白—γ-H2AX、53BP1表達(dá)，延長G2/M期停滯，加重放療后腫瘤細(xì)胞內(nèi)的DNA損傷，增加腫瘤凋亡，從而增進(jìn)放療療效；3、本研究顯示，在DSB修復(fù)路徑中的關(guān)鍵蛋