漢防己甲素對人肺腺癌細胞的放射增敏作用及其機制的實驗研究.pdf

1、目的： 臨床上一些腫瘤對放射治療并不敏感，為提高放療效果人們采用了各種方法。其中化學(xué)藥物的增敏作用是研究的熱點之一。本研究旨在觀察漢防己甲素對人肺腺癌細胞的放射敏感性的影響，并初步研究其作用機制。以明確漢防己甲素對人肺腺癌細胞是否有放射增敏作用及其機理。為臨床應(yīng)用的開展提供一定的理論基礎(chǔ)。 方法： 1、本研究的靶細胞為體外培養(yǎng)的人肺腺癌SPC-A1細胞。采用MTT法檢測漢防己甲素對SPC-A1細胞的細胞毒作用。將

2、SPC-A1細胞分為不同濃度漢防己甲素處理組，并設(shè)立陰性對照組。分別在24h、48h和72h時檢測OD值，并據(jù)其計算出半數(shù)抑制濃度。 2、根據(jù)細胞毒實驗的結(jié)果，選擇1μmol/L濃度的漢防己甲素來進行增敏研究。采用MTT法來比較單純照射4Gy、照射4Gy后進行漢防己甲素處理、單用漢防己甲素及對照組之間OD值的差異和細胞抑制率的差異。 3、采用克隆形成法來研究漢防己甲素對SPC-A1細胞的放射敏感性的影響。將兩組的數(shù)據(jù)分別

3、采用多靶單擊模型和線性二次方程來擬合細胞存活曲線，并計算放射敏感性參數(shù)D0、Dq、α/β、SF2，以比較漢防己甲素對SPC-Al細胞的增敏作用。 4、采用流式細胞術(shù)來研究漢防己甲素對SPC-Al細胞放射增敏作用的機制。檢測不同濃度的漢防己甲素處理組和照射后進行漢防己甲素處理組的G2期細胞數(shù)的比例。以證實輻射是否會引起SPC-Al細胞的G2期阻滯，以及漢防己甲素是否有清除由輻射導(dǎo)致的SPC-Al細胞的G2期阻滯的作用。 結(jié)

4、果： 1、不同濃度的漢防己甲素作用于人肺腺癌SPC-Al細胞，在24h、48h及72h時其細胞毒作用均呈濃度依賴性。其24h、48h、72h半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為：10.77μmol/L、5.78μmol/L、和3.89μmol/L。 2、MTT法檢測結(jié)果顯示照射后加漢防己甲素組的OD值較單純照射組降低(p<0.05)，細胞抑制率較單純照射組提高(p<0.05)，提示漢防己甲素提高了X射線對SPC-Al細胞的殺傷

5、作用。 3、克隆形成實驗結(jié)果顯示漢防己甲素降低了受到照射后的SPC-Al細胞的克隆形成率。據(jù)存活分數(shù)擬合細胞存活曲線計算出的表示放射敏感性的指標D0、Dq、α/β、SF2均提示漢防己甲素提高了放射敏感性(p<0.05)。放射增敏比(SER)按多靶單擊模型計算為1.48，按線性二次方程(L-Q模型)計算為1.414、流式細胞儀檢測細胞周期的結(jié)果顯示照射導(dǎo)致了SPC-Al細胞的G2期阻滯(p<0.01)。加用漢防己甲素后可以清除這種