CAPE對(duì)人宮頸癌細(xì)胞放射增敏作用及機(jī)理研究.pdf

1、目的：研究咖啡酸苯乙酯(CAPE)對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞放射增敏作用及機(jī)制。檢測(cè)CAPE濃度及作用時(shí)間對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制效應(yīng)，確定用作放射增敏實(shí)驗(yàn)的藥物濃度及時(shí)間；研究CAPE對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的放射增敏作用；探討CAPE的放射增敏機(jī)理，為研究放射增敏劑的作用機(jī)制積累實(shí)驗(yàn)資料。 方法： (1)以人宮頸癌Hela細(xì)胞為研究對(duì)象，采用MTT技術(shù)，經(jīng)濃度為0、6、10、20、30、40μg／ml的CAPE作用24

2、小時(shí)，分析細(xì)胞抑制率與藥物濃度的關(guān)系；濃度為20μg/mlCAPE與細(xì)胞作用O、12、24、48、72小時(shí)，分析細(xì)胞抑制率與CAPE作用時(shí)間的關(guān)系； (2)細(xì)胞經(jīng)0、2、4、6、8Gy劑量的60Coγ射線照射，比較單純照射組和照射+CAPE組的克隆存活率，并求出增敏比(SER)t細(xì)胞經(jīng)0、1、2、3、4Cr60Coγ射線照射后觀察比較單純照射組和照射+CAPE組之間細(xì)胞微核率及微核細(xì)胞率的差異； (3)利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)

3、細(xì)胞周期分布、western-blot技術(shù)檢測(cè)周期蛋白CyclinB1的表達(dá)情況。 結(jié)果： (1)人宮頸癌Hela細(xì)胞經(jīng)不同濃度的CAPE作用后，細(xì)胞抑制率呈濃度依賴(lài)性增高(P<0.01)，細(xì)胞抑制率為20％的CAPE濃度為20μg／ml； (2)濃度為20μg／ml的CAPE與Hela細(xì)胞作用不同時(shí)間，細(xì)胞抑制率呈時(shí)間依賴(lài)性增加(P<0.01)； (3)細(xì)胞經(jīng)60Coγ射線照射后，Hela細(xì)胞克隆存活率

4、隨著照射劑量的增加而降低(P<0.01)；相同劑量下，照射+CAPE組的Hela細(xì)胞克隆存活率低于單純照射組(P<0.01)；照射+CAPE組的Hela細(xì)胞的平均致死劑量(D0)(1.82Cry、1.45Gy)、準(zhǔn)閾劑量(Dq)(3.21Gy、1.89Gy)較單純照射組減小，SER為1.26>1； (4)相同60Coγ射線照射下，照射+CAPE組細(xì)胞微核率及微核細(xì)胞率均高于單純照射組(P<0.01)，兩者細(xì)胞微核率及微核細(xì)胞率與

5、照射劑量呈正相關(guān)(P<0.01)，均可擬合成劑量效應(yīng)直線方程y=a+bD(D為照射劑量)； (5)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，CAPE組及照射組G2／M期的細(xì)胞比例升高(P<0.01)，而在照射+CAPE組則降低．(P<0.05)； (6)western-blot分析，CAPE聯(lián)合照射及單純照射，CyclinB1蛋白表達(dá)均隨著照射劑量增大而減少；相同照射劑量下，CAPE聯(lián)合照射的Hela細(xì)胞CyclinB1蛋白表達(dá)

6、較單純照射減小。 結(jié)論： (1)CAPE對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制率在研究的濃度范圍內(nèi)呈濃度依賴(lài)性； (2)CAPE對(duì)Hela細(xì)胞的抑制率在研究的時(shí)間范圍內(nèi)呈時(shí)間依賴(lài)性； (3)Hela細(xì)胞克隆存活率與照射劑量呈負(fù)相關(guān)；相同劑量下照射+CAPE組的克隆存活率低于單純照射組；CAPE對(duì)Hela細(xì)胞的放射增敏作用可能與抑制細(xì)胞的亞致死性損傷修復(fù)能力有關(guān)； (4)Hela細(xì)胞微核率和微核細(xì)胞率與照射劑