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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究分為兩部分。
第一部分,目的:研究Livin shRNA對(duì)人宮頸癌細(xì)胞系siha細(xì)胞增殖、遷移的影響。
方法:
1、脂質(zhì)體法將靶向沉默Livin基因短發(fā)夾狀RNA(shRNA)的真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染siha細(xì)胞獲得穩(wěn)定細(xì)胞株。
2、MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖的變化。
3、Transwell 小室法檢測(cè)對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響。
結(jié)果:
Liv
2、in shRNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染siha細(xì)胞后,細(xì)胞增殖能力下降(P<0.05),體外遷移能力下降(P<0.001),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
Livin基因沉默能抑制宮頸癌細(xì)胞系siha細(xì)胞增殖能力,并降低細(xì)胞的遷移能力,為宮頸癌的基因治療提供新靶點(diǎn)。
第二部分:RNA干擾沉默Livin對(duì)人宮頸癌細(xì)胞系siha細(xì)胞化療增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究
目的:研究Livin shRNA對(duì)增加人宮頸癌
3、細(xì)胞系siha化療敏感性的作用及價(jià)值。
方法:
MTT法檢測(cè)加藥后細(xì)胞的增殖情況,用統(tǒng)計(jì)軟件得出IC50;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞在上述IC50的凋亡率。
結(jié)果:
1、shLivin重組質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染siha細(xì)胞后,對(duì)順鉑、紫杉醇、阿霉素的IC50(mg/l)分別為7.34±0.23,18.02±3.66,8.75±1.53;shVector組分別為15.55±0.49,35.10±1.7
4、8,17.02±1.67;未轉(zhuǎn)染siha組分別為16.12±0.52,34.33±2.72,19.89±1.72。shLivin組IC50明顯低于shVector組和siha組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。
2、用上述shLivin IC50藥物測(cè)得各組細(xì)胞的凋亡率分別為shLivin組(17.47±0.68)%,(10.77±1.43)%,(13.7±2.3)%;shVector組(3.3±0.52)%,(1
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