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1、目的:應(yīng)用集落形成法研究三氧化二砷對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞系的放射增敏作用及機(jī)制。 方法:利用四甲基偶氮唑藍(lán)比色試驗(yàn)法(MTT法)測(cè)定三氧化二砷(As2O3)對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞的藥物敏感性,計(jì)算出三氧化二砷的50%抑瘤濃度ID50。取20%ID50以下四個(gè)濃度作為研究放射增敏效應(yīng)的濃度進(jìn)行放射增敏試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分空白對(duì)照組、單純照射組、單純加藥組和照射加藥組。照射加藥組細(xì)胞在放療前加入不同濃度的三氧化二砷,放入37℃,5%CO2恒溫培
2、養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)后給予不同劑量率照射,照射劑量為1Gy,3Gy,5Gy,7Gy,9Gy。應(yīng)用集落形成方法觀察單純照射與照射加藥組對(duì)細(xì)胞的作用,利用單擊多靶數(shù)學(xué)模型擬合放射劑量—細(xì)胞存活曲線,觀察三氧化二砷對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞的放射增敏作用,流式細(xì)胞法觀察空白對(duì)照組和單純加藥組細(xì)胞周期分布的變化。 結(jié)果:三氧化二砷對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞系的ID50約為30umol/l,單純照射組D0值為1.25Gy,Dq值為1.95Gy。不同濃度
3、三氧化二砷組經(jīng)照射后D0值依次為1.10Gy(1umol/l),0.99Gy(2umol/l),0.91Gy(2.5umol/l),0.56Gy(5umol/l);Dq值依次為1.717Gy(1umol/l),1.578Gy(2umol/l),1.419Gy(2.5umol/l),0.874Gy(5umol/l);放射增敏比依次為1.136(1umol/l),1.263(2umol/l),1.374(2.5umol/l),2.23(5u
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