鹽酸?？颂婺釋θ松圜[癌Tca8113細胞抑制作用的研究.pdf

1、舌癌(carcinoma of tongue)是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤，其生物學特性非常復雜，腫瘤發(fā)展快，術后復發(fā)率高，愈后較差。提高舌癌治療療效的關鍵在于預防和選擇合理的綜合治療方案。近年來，一些新的方法及新模式相繼引入舌癌臨床治療，確立了以外科手術為主的舌癌綜合治療概念。分子生物學的迅猛發(fā)展，使得腫瘤生物治療成為繼手術、放療、化療之后的第四種治療模式。而分子靶向藥物在多種實體瘤的臨床應用，更充滿了生機和活力。表皮生長因子受體酪氨

2、酸激酶(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase，EGFR-TK)抑制劑是新近出現的、對實體腫瘤確有療效的靶向治療藥物。鹽酸?？颂婺?克美納)是一種靶向表皮生長因子受體的酪氨酸激酶抑制劑，有學者報道其在體外可抑制人表皮細胞癌(A431)、人胃腺癌細胞(BGC-823)的生長增殖。但它對舌癌的作用如何，還未見有關研究報道。本試驗通過體外培養(yǎng)人舌鱗狀細胞癌(’ronguesquamou

3、s cell carcinoma)Tca8113細胞，采用不同濃度的鹽酸埃克替尼作用不同的時間，然后觀察腫瘤細胞的生長狀態(tài)、細胞周期分布、細胞凋亡情況和細胞蛋白，如：細胞周期調節(jié)蛋白cyclinD<,1>、P<,27>、基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、上皮性鈣粘附蛋白(E-cadherin，E-cad)的表達變化。為進一步了解酪氨酸激酶抑制劑對腫瘤細胞的作用機制提供有意義的試驗資料

4、，為酪氨酸激酶抑制劑用于舌鱗狀細胞癌的治療提供依據。 目的 探討表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑鹽酸?？颂婺釋w外培養(yǎng)的人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞的抑制作用及其可能機制。 材料與方法 1．人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞由上海交通大學口腔醫(yī)學院惠贈。 2．鹽酸?？颂婺?克美納)由浙江貝達藥業(yè)有限公司惠贈。 3．采用四甲基偶氮嘩鹽光吸收法(MTT法)檢測鹽酸?？颂婺嵩跐舛葹?μmol/

5、L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L時作用于人舌鱗癌Tca-8113細胞后12h、24h、48h、72h、96h的細胞增殖情況，計算各組細胞的增殖抑制率。倒置顯微鏡觀察細胞生長狀態(tài)及形態(tài)學改變。 4．采用流式細胞儀分析細胞周期變化、檢測細胞凋亡率。 5．采用間接免疫熒光聯合流式細胞技術及免疫細胞化學方法檢測鹽酸?？颂婺釋θ松圜[癌Tca8113細胞cyclinD<,1>、P<,27>、

6、MMP-9、E-cad蛋白表達的影響。 6．應用SPSS13.0統計學軟件，計量資料以均數±標準差(X±s)表示，采用重復測量數據方差分析。檢驗水準α=0.05。 結果 1．鹽酸埃克替尼對人舌鱗癌Tca8113細胞增殖的抑制作用：同一時間點不同濃度鹽酸?？颂婺?5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)對人舌鱗癌Tca8113細胞的抑制作用，隨濃度增加而增強(P<0.

7、01)；同一濃度鹽酸?？颂婺嵩诓煌瑫r間點(12h、24h、48h、72h、96h)對人舌鱗癌Tca8113細胞的抑制作用，隨時間增加而增強(P<0.01)?？偟膩碚f，鹽酸?？颂婺釋θ松圜[癌Tca8113細胞的生長抑制作用具有劑量和時間依賴性。 2．鹽酸?？颂婺釋θ松圜[癌Tca8113細胞細胞周期、細胞凋亡的影響表現在：隨鹽酸?？颂婺釢舛取⒆饔脮r間的增加，G<,0>/G<,1>期細胞比例逐漸增加，細胞凋亡率增加。統計顯示其G<,0

8、>/G<,1>期阻滯作用及細胞凋亡率均與濃度、作用時間成正相關。 3．鹽酸?？颂婺嶙饔糜谌松圜[癌Tca8113細胞后cyclinD<,1>、MMP-9陰性表達；P<,27>、E-cad陽性表達。 結論 1．鹽酸?？颂婺崮芤种迫松圜[癌Tca8113細胞的增殖，其抑制作用具有時間和濃度依賴性。 2．鹽酸埃克替尼能改變人舌鱗癌Tca8113細胞的細胞周期分布，有明顯的G<,0>/G<,1>期阻滯作用，并誘導細胞