魯斯可皂苷元對人肺癌A549和H460細胞的作用機理研究.pdf

1、研究目的:探討國醫(yī)大師周仲瑛經(jīng)驗方“周氏克金巖方”中麥冬之單體魯斯可皂苷元在抗人肺癌A549細胞和H460細胞方面的作用機制，進一步闡述周仲瑛教授“癌毒”理論的分子生物學基礎，為研制新的有效的抗腫瘤藥物奠定理論基礎。
　　研究方法:體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞和H460細胞，以順鉑為陽性對照組，不同濃度魯斯可皂苷元為實驗組，采用MTT法檢測魯斯可皂苷元對人肺癌A549細胞和H460細胞生長的影響;利用流式細胞技術(shù)檢測藥物作用后的細胞

2、凋亡率及周期分布情況;運用Western Blot法檢測藥物對周期相關(guān)蛋白表達的影響;運用Transwell小室法檢測魯斯可皂苷元對細胞侵襲能力的影響。
　　研究結(jié)果:MTT結(jié)果顯示:12.5～100umol/L的魯斯可皂苷元具有明顯的抑制人肺癌A549細胞和H460細胞增殖的作用，而且結(jié)果呈明顯時-效和量-效關(guān)系，與空白對照組相比有明顯差異。流式細胞儀檢測結(jié)果提示，魯斯可皂苷元作用人肺癌A549細胞和H460細胞24h后，細胞發(fā)

3、生凋亡，且凋亡率與劑量呈正相關(guān)性;而與空白對照組相比，G0/G1期細胞相對減少，S期細胞比例相對增加，說明細胞被阻滯于S期。Western Blotting檢測結(jié)果表明，魯斯可皂苷元作用于細胞24h后，隨著藥物濃度的增加，p53和p21蛋白的表達增強，而同時CDK2和CyclinE2蛋白表達降低。Transwell實驗發(fā)現(xiàn)魯斯可皂苷元可以抑制肺癌細胞的侵襲能力。
　　研究結(jié)論:魯斯可皂苷元是麥冬的有效抗癌活性成分之一;魯斯可皂苷元