川陳皮素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞株的抑制作用及作用機(jī)理的研究.pdf

1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文川陳皮素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞株的抑制作用及作用機(jī)理的研究姓名：管曉琳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：周黎明20060510●●●四川大學(xué)碩(博)士學(xué)位論文川陳皮素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞株的抑制作用及作用機(jī)理的研究研究生管曉琳藥理學(xué)專業(yè)指導(dǎo)老師周黎明副教授中文摘要目的：為探討川陳皮素對(duì)癌細(xì)胞的抑制作用及作用機(jī)理，為川陳皮素最終能被開發(fā)成抗癌藥物奠定一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，擬在本課題中，通過體外實(shí)驗(yàn)觀察不同劑量

2、的川陳皮素對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖及生物學(xué)性狀的影響，并探討產(chǎn)生這種影響的原因。方法：為研究川陳皮素對(duì)A549的增殖抑制作用，用MTr法分析2、4、8、16、32、64、128pg／ml的川陳皮素對(duì)A549細(xì)胞的增殖抑制情況，并計(jì)算半數(shù)抑制濃度IC50：以25pg／m!、50Itg／ml／Il陳皮素，阿霉素01pg／ml為陽(yáng)性對(duì)照作用于A549細(xì)胞繪N5天生長(zhǎng)曲線；以10pg／ml、20pg／ml、40pg／m1)ll陳皮素，阿霉素01p

3、g／ml為陽(yáng)性對(duì)照作用于A549細(xì)胞，觀察細(xì)胞的集落形成情況，并計(jì)算集落形成抑制率。為探討川陳皮素對(duì)A549的抑制作用機(jī)理是否為誘導(dǎo)凋亡，以25pg／ml，5pg／ml，10pg／ml，20pg／m1)ll陳皮素作用48小時(shí)后，Giemsa染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化，Hoeehst33258熒光染色觀察細(xì)胞核形態(tài)變化；電鏡觀察80rtg／mt)ll陳皮素作用48小時(shí)后細(xì)胞形態(tài)變化；以10pg／ml，20pg／ml，40rtg／m1)ll陳皮素

4、分別處理細(xì)胞48／J、時(shí)、72小時(shí)后，DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA的斷裂情況，檢測(cè)細(xì)胞凋亡；以10pg／ml，20pg／ml，40pg／mlN陳皮素分別處理細(xì)胞48小時(shí)，80pg／ml川陳皮素處理細(xì)胞24／J、時(shí)后，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期的改變、凋亡率及凋亡相關(guān)蛋EtBax和Bel2的表達(dá)。結(jié)果：MTT法提示川陳皮素濃度為4pg／ml一128I_tg／ml時(shí)。對(duì)A549細(xì)胞在藥物處理24、48、72時(shí)后抑制率為80／085％，241