柴胡皂苷A與黃芩素配伍抗人肺癌細胞A549、H460體外作用的實驗研究.pdf

1、　　目的：探討柴胡皂苷 A與黃芩素配伍抗肺癌細胞 A549 和 H460 增殖、促進其凋亡的作用機制以及其協(xié)同作用。
　　方法：本研究主要通過體外抗腫瘤實驗,將柴胡和黃芩的主要活性成分柴胡皂苷 A 與黃芩素配伍給藥作用于人肺癌細胞株 A549、H460 細胞,用 MTT 法測定二者單用及配伍對肺癌細胞增殖的影響；采用免疫組化法檢測細胞人肺癌細胞株 A549 和 H460 凋亡相關基因 bcl-2、caspase-3 和 cox

2、-2 蛋白表達水平；用流式細胞儀 Annexin V-FITC/PI 雙標法檢測人肺癌細胞株 H460 和 A549 細胞凋亡率；采用流式細胞儀 Propidium Iodide(PI)單標法檢測對人肺癌細胞株 A549、H460 細胞周期進程的影響。
　　結(jié)果：體外細胞毒實驗( MTT)中發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A(12.5μg/ml,20μg/ml,25μg/ml,50μg/ml,100μg/ml)和黃芩素(50μg/ml,75μg/

3、ml,100μg/ml, 150μg/ml,200μg/ml)配伍對人肺癌細胞株A549、H460細胞的增殖作用明顯強于二者單獨給藥；流式細胞儀顯示經(jīng)藥物處理48h后,與對照組及兩藥單用組相比A549配伍組的細胞凋亡率明顯增高；流式細胞儀檢測細胞周期結(jié)果顯示,與陰性對照組比較,柴胡皂苷A和黃芩素作用于人肺癌細胞株A549、H460細胞48h后均能使G0/G1期細胞數(shù)量顯著增加,配伍組作用48h后, H460和A549細胞的G0/G1期和

4、S期細胞數(shù)量均增加,與兩藥單用組比較均有顯著性差異,說明兩藥配伍有協(xié)同抑制作用；免疫細胞化學染色發(fā)現(xiàn)人肺癌細胞株A549細胞凋亡相關基因bcl-2表達降低, cox-2、caspase-3表達升高,且配伍組作用明顯強于柴胡皂苷A組和黃芩素組。
　　結(jié)論：柴胡和黃芩主要活性成分柴胡皂苷 A 與黃芩素對抑制人肺癌細胞株 A549 和 H460 細胞的增殖具有明顯的配伍協(xié)同作用；柴胡皂苷 A與黃芩素抗肺癌配伍協(xié)同的作用機制可能是通過