柴胡皂苷與黃芩苷配伍抗人肝癌細胞 SMMC-7721和HepG2體外作用的實驗研究.pdf

1、　　目的：探討柴胡皂苷與黃芩苷配伍抗肝癌的協(xié)同作用及其機制。
　　方法：本研究主要通過體外抗腫瘤實驗,將柴胡和黃芩的主要活性成分柴胡皂苷與黃芩苷配伍給藥作用于人肝癌 SMMC-7721 和 HepG2 細胞,用 MTT 法測定二者單用及配伍對肝癌細胞增殖的影響；采用流式細胞儀 Propidium Iodide(PI)單標法檢測對 SMMC-7721 和 HepG2細胞周期進程的影響；用流式細胞儀 Annexin V-FITC/

2、PI 雙標法檢測 SMMC-7721和 HepG2細胞凋亡率；采用免疫組化法檢測細胞 SMMC-7721 凋亡相關基因 bcl-2、caspase-3 和 cox-2 蛋白表達水平。
　　結(jié)果：體外細胞毒實驗( MTT)中發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷(100 ug/ml,200 ug/ml, 400ug/ml, 800ug/ml, 1600ug/ml)和黃芩苷(10ug/ml, 20ug/ml, 30ug/ml, 40ug/ml, 50ug/

3、ml)配伍對SMMC-7721和HepG2細胞的增殖作用明顯強于二者單獨給藥；流式細胞儀顯示經(jīng)藥物處理48h后,與對照組及兩藥單用組相比, SMMC-7721和HepG2配伍組的細胞凋亡率明顯增高；流式細胞儀檢測細胞周期結(jié)果顯示,與陰性對照組比較,柴胡皂苷作用于肝癌SMMC-7721和HepG2細胞48h后均能使G0/G1期細胞數(shù)量顯著增加,黃芩苷作用于肝癌SMMC-7721和HepG2細胞48h后均能使G0/G1、G2/M期細胞數(shù)量顯

4、著減少, S期細胞所占比例顯著增加,配伍組作用 48h后, SMMC-7721和HepG2細胞的G0/G1期和S期細胞數(shù)量均增加,與兩藥單用組比較均有顯著性差異,說明兩藥配伍有協(xié)同抑制作用；免疫細胞化學染色發(fā)現(xiàn)肝癌SMMC-7721細胞凋亡相關基因bcl-2表達降低, cox-2、caspase-3表達升高,且配伍組作用明顯強于柴胡皂苷組和黃芩苷組。
　　結(jié)論：柴胡和黃芩主要活性成分柴胡皂苷與黃芩苷對抑制肝癌SMMC-7721